低倍鏡、高倍鏡的使用方法

偏光顯微鏡的使用方法

一）低倍鏡、高倍鏡的使用練習(xí)

1. 觀察文字或字母裝片：取一片字母裝片，用低倍鏡觀察，反復(fù)練習(xí)對(duì)光、調(diào)光、標(biāo)本放置和調(diào)節(jié)焦距等。如將玻片前后左右移動(dòng)時(shí)，注意物像與玻片移動(dòng)方向是否一致，玻片上的字母是正像還是反像，為什么?

2. 觀察羊（或頭發(fā)）交叉裝片：取一張毛（發(fā)）交叉裝片，先用低倍鏡觀察，找到兩根毛（發(fā)）后，再將毛（發(fā)）交叉點(diǎn)移到視野中央，然后換高倍鏡觀察，再輕微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器，觀察不同層次，判定哪條毛（發(fā)）在上方，哪條位于下方。

（二）油鏡的使用練習(xí)

1. 取一張血涂片或取血一小滴，滴于清潔的載玻片一端，另取一張邊緣平整的載玻片，做成血涂片。先用低倍鏡再用高倍鏡進(jìn)行觀察。

2. 用油鏡觀察，并分辨紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，比較三種物鏡的放大倍數(shù)和分辨率。

3. 觀察兔脊神經(jīng)節(jié)切片（示固定染色的細(xì)胞）

取兔脊神經(jīng)節(jié)切片標(biāo)本先在調(diào)好光線的低倍鏡下觀察（固定染色的標(biāo)本需調(diào)較亮光線），低倍鏡下找到要觀察的標(biāo)本，為淡紫色的神經(jīng)節(jié)切面，在其外圍包有被膜，且向內(nèi)伸入，形成神經(jīng)節(jié)的結(jié)締組織支架，節(jié)內(nèi)有許多大小不等的神經(jīng)細(xì)胞，呈散在分布。然后轉(zhuǎn)換高倍鏡，選擇完整而清晰的圓形

神經(jīng)細(xì)胞仔細(xì)觀察其內(nèi)部結(jié)構(gòu)?？梢姷皆诩?xì)胞中央有一圓形核，核內(nèi)有著色為深紫紅色的圓形核仁及染色質(zhì)顆粒，核與細(xì)胞膜之間是均勻淺紫色的細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞的外面圍有若干個(gè)被囊細(xì)胞，它起保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的作用。在神經(jīng)細(xì)胞之間還可看到有軸索橫斷面和許多神經(jīng)纖維，多呈交錯(cuò)排列。

4. 觀察完畢，務(wù)必將油鏡按正確方法擦凈。

偏光顯微鏡物鏡中心調(diào)節(jié)方法

（1）觀察旋轉(zhuǎn)工作臺(tái)上的切片，在切片中找一小黑點(diǎn)，使位于目鏡十字線中心。

（2）轉(zhuǎn)動(dòng)工作臺(tái)，若物鏡光軸中心O與工作臺(tái)中心不一致，黑點(diǎn)即離開十字線中心繞一個(gè)圓轉(zhuǎn)動(dòng)。圓的中心S即為工作臺(tái)的中心。

（3）將小黑點(diǎn)轉(zhuǎn)至距十字線中心遠(yuǎn)的1點(diǎn)處，旋轉(zhuǎn)物鏡座上兩個(gè)調(diào)節(jié)螺絲使小黑點(diǎn)自1處移至O-1直線的中點(diǎn)（即1點(diǎn)距十字線中心距離的一半）。

（4）如此循環(huán)進(jìn)行上述三步驟可使物鏡光軸與旋轉(zhuǎn)工作臺(tái)中心重合。

為什么偏光顯微鏡鏡頭和鏡片上需要鍍膜?

鏡片為何需要鍍膜？

為什么偏光顯微鏡鏡頭和鏡片上需要鍍膜？這是因?yàn)槿魏挝矬w對(duì)光線都有反射作用，連無色透明的玻璃也不例外，差別在于光線的角度是否會(huì)形成反射效果。對(duì)于理想狀態(tài)下的鏡片而言，光線能夠完全透過鏡頭，并正確的在底片或CCD上完全聚焦。然而，事實(shí)上卻是每一種鏡片都受到自身物理因素的限制，導(dǎo)致像差的產(chǎn)生，所以由眾多有『?jiǎn)栴}』的鏡片所結(jié)合而成的偏光顯微鏡鏡頭是不可能讓理論上所有各種角度的光線完全穿過。

以氧化鑭光學(xué)玻璃為例子，其透光率可達(dá)到90%以上，剩下的10%則會(huì)反射出去，形成炫光。為了彌補(bǔ)這項(xiàng)缺失，后來的鏡片研究者開發(fā)了在透鏡表面鍍上一層膜來增加透光效果。

偏光顯微鏡的照明設(shè)備可分為以下兩種

??1． 透射式照明 ??透射式照明法分中心照明和斜射照明兩種形式： ??（1） 中心照明：這是的透射式照明法，其特點(diǎn)是照明光束的中軸與偏光顯微鏡的光軸同在一條直線上。它又分為“臨界照明”和“柯勒照明”兩種。 ??A． 臨界照明（Critical illumination）:這是普通的照明法。這種照明的特點(diǎn)是光源經(jīng)聚光鏡后成像在被檢物體上，光束狹而強(qiáng)，這是它的優(yōu)點(diǎn)。 ??B． 柯勒照明：柯勒是十九世紀(jì)末蔡司廠的工程師,為了留念他在光學(xué)領(lǐng)域的突出貢獻(xiàn),后人把他發(fā)明的二次成像叫做柯勒照明. 柯勒照明克服了臨界照明的缺陷，是研究用偏光顯微鏡中的理想照明法。這中照明法不僅調(diào)查效果佳，并且是成功地進(jìn)行顯微照相所有必要的一種照明法。光源的燈絲經(jīng)聚光鏡及可變視場(chǎng)光闌后，燈絲像次落在聚光鏡孔徑的平面處，聚光鏡又將該處的后焦點(diǎn)平面處構(gòu)成第2次的燈絲像。這樣在被檢物體的平面處沒有燈絲像的構(gòu)成，不影響調(diào)查。此外照明變得均勻。調(diào)查時(shí)，可改動(dòng)聚光鏡孔徑光闌的巨細(xì)，使光源充溢不同物鏡的入射光瞳，而使聚光鏡的數(shù)值孔徑與物鏡的數(shù)值孔徑匹配。一起聚光鏡又將視場(chǎng)光闌成像在被檢物體的平面處，改動(dòng)視場(chǎng)光闌的巨細(xì)可控制照明范圍。此外，這種照明的熱焦點(diǎn)不在被檢物體的平面處，即使長(zhǎng)時(shí)間的照明，也不致?lián)p害被檢物體。2004年蔡司公司又在傳統(tǒng)柯勒式照明基礎(chǔ)上推出了帶有反光碗的全系統(tǒng)復(fù)消色差照明技能，消除照明色差，增強(qiáng)光的還原性，從而進(jìn)步分辨率，一起照明均勻而光效高。 ??（2） 斜射照明：這種照明光束的中軸與偏光顯微鏡的光軸不在一向線上，而是與光軸構(gòu)成必定的角度斜照在物體上，因而成斜射照明。相襯顯微術(shù)和暗視野顯微術(shù)就是斜射照明。 ??2． 反射式照明 ??這種照明的光束來自物體的上方經(jīng)過物鏡后射到被檢物體上，這樣物鏡又起著聚光鏡的效果。這種照明法是適用于非通明物體，如金屬，礦藏等。