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發(fā)布時間:2021-06-28 07:18  

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在 pH和 pKa相同的情況下,[a]/[HA]為1。這就是說,此時50%弱酸性化合物是陰離子態(tài),另50%為中性態(tài)。這種 pH環(huán)境下,即使這些呈陰離子狀態(tài)的化合物地被陰離子交換劑吸附,然后地洗脫,也只能得到50%的回收率。由于只有50%的弱酸化合物處于離子狀態(tài),所以被陰離子交換劑吸附。因此,控制環(huán)境 pH值對于離子交換固相萃取非常重要。

較弱的酸性化合物離子化的程度越高,代表了較強的[A=[HA]。從理論上講,當[A]/[HA]等于100時,99%的弱酸性化合物都是陰離子,并且能被陰離子交換劑吸附。按照式三,要使弱酸性化合物在陰離子固相萃取吸附時99%的離子化,樣品基質(zhì)的 pH值應高于化合物 pKa至少兩個 pH單位。相反,在對弱酸性化合物的洗脫過程中,環(huán)境中的 pH值應調(diào)整到低于化合物 pKa的至少兩個 pH單位以下,此時弱酸性化合物99%是中性狀態(tài),用適當?shù)娜軇年庪x子交換柱洗脫。

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淋洗液如果是水,不進行抽干,就會有一部分被收集到洗脫液中,洗脫液如果進行氮吹,則含水的洗脫液也很難進行抽干。

如果進行長時間的氮吹,則少量的水溶液會被吹干,從而導致回收率較低的情況出現(xiàn),因此淋洗后就需要進行抽干操作。

洗脫后會有部分洗脫溶劑殘留在填料上,填料用量較大時,洗脫液甚至會殘留1~2毫升,使洗脫液不能完全回收,造成回收率低、平行性差。

為確保洗脫的溶劑和目標物得到充分回收,還需要對其進行脫水。




廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。CN固相萃取柱分類

用溶劑的次序也會影響流動速度,如活化溶劑是二氯甲1烷,平衡溶劑是水,因為二氯甲1烷與水不互溶,活化平衡時間的流動速度較慢。因此,我們建議在兩種非互溶溶劑之間加入過渡溶劑甲1醇,這樣就能解決這個問題。

氣層效應

氣層可以阻止液體流動,從而引起流速問題。氣層形成的主要原因是篩板或填料松動。商品產(chǎn)品通過運輸?shù)接脩羰种?,在運輸過程中,填與篩板之間發(fā)生位移、松動,很容易形成氣層。這個氣氣層有時會更明顯,能看出填充物有斷裂或縫隙。有時候松動并不明顯,使用小柱體時才能感覺到流速的不同。這樣,通過壓實篩板或使用正負壓將空氣排出即可解決輕微松動問

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固相萃取柱能否重復使用?

回答:理論上說,可以洗干凈后再使重復使用,因為在沖洗過程中不能保證完全沖洗干凈,其殘留物質(zhì)在下次使用可能會對被測物造成干擾,導致回收率和重現(xiàn)性差!

相同規(guī)格、不同品牌的固相萃取小柱樣做相同樣品為何回收率不同?

答:不同品牌的小柱雖然等效規(guī)格固定也一樣,但其填充源、接合技術、裝填工藝等因素都會造成樣品回收率的差異!

規(guī)范中規(guī)定某一品牌的固相萃取柱,是否可以用其它同一品牌的固相萃取柱代替?

回答:理論上都可以,但是有些時候所測定的基質(zhì)和物質(zhì)比較復雜,使用標準推薦的固相萃取小柱可能會獲得更好的回收率和重現(xiàn)性!



劑時值;

洗滌液通道和柱子,有溫度控制,加熱到30攝氏度容易沖洗;

長期使用緩沖液應注意觀察接頭處是否有析出,如有白鹽析出,用10%硝i酸定期沖洗液路(取出柱子,沖洗30 mL10%硝i酸溶液,再用5倍水沖洗)可避免液路堵塞;

選用緩沖液要使用可靠的試劑,避免不純鹽引起不必要的麻煩;過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同,但溶液中不含緩沖鹽。

對由非極性力吸附到反相 SPE柱上的目標物,可用弱極性溶劑洗脫,如氯i仿、環(huán)己i烷、乙i酸乙i酯等。只有當溶劑的洗脫強度足夠大時,才能使目標物與吸附劑之間的范德華力破壞,使目標物從 SPE柱洗脫。即使是極性更強的甲i醇,對許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候,單種溶劑無法徹底洗脫疏水性強的目標物,可以考慮使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,體積比)。

反相模式下,溶劑體系的極性應以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減,并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標物,所選擇的淋洗劑應在不洗脫目標物的前提下,zui大限度地洗脫干擾物,所選洗脫劑應能碰巧完全洗脫目標物。