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陜西亞細胞定位服務(wù)廠家推薦「邁斯普」

發(fā)布時間:2021-07-29 02:27  

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注意: 1、不建議將爬片泡酸后高壓滅菌,首先玻片太薄高壓容易使玻片變形,其次濕滅很容易使玻片上留下水漬影響細胞貼壁;

   2、接細胞時控制合適的細胞量,避免收樣時細胞量過度擁擠甚至打堆影響結(jié)果的觀察。


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實驗介紹:亞細胞定位技術(shù)服務(wù)是將目標蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合,通過瞬時轉(zhuǎn)化技術(shù)或者遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),使得該融合蛋白在受體材料細胞內(nèi)表達,目標蛋白會牽引熒光蛋白一起定位到目標細胞器,通過觀察熒光蛋白在細胞內(nèi)顯示的位置,確定目標蛋白的位置,從而確定目標蛋白的亞細胞定位情況。4)用針頭在植物葉片上避開葉脈扎孔,用無針頭將侵染菌液從扎孔處注射至植物葉片內(nèi)。


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研究者首先通過熒光成像技術(shù)來定義細胞器和亞細胞區(qū)的蛋白質(zhì)組信息。通過測定30個亞細胞結(jié)構(gòu)的蛋白定位,在細胞圖譜中定義了13個亞細胞蛋白質(zhì)組以及分泌蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)組,通過熒光顯微鏡在細胞圖譜中注釋的亞細胞結(jié)構(gòu)。注意:1、不建議將爬片泡酸后高壓滅菌,首先玻片太薄高壓容易使玻片變形,其次濕滅很容易使玻片上留下水漬影響細胞貼壁。研究人員以蛋白質(zhì)圖譜中的蛋白空間信息對蛋白的互作關(guān)系進行驗證(圖5)。結(jié)果表明,在質(zhì)膜上的蛋白擁有更多的機會與質(zhì)膜、高爾基體、囊泡、黏著斑、細胞接頭及細胞溶質(zhì)中的蛋白發(fā)生直接的互作關(guān)系。



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確定亞細胞定位有多種方法,其中較常見的是目的蛋白與Marker的熒光雙染,然后用熒光顯微鏡來觀察。蛋白質(zhì)的亞細胞定位實驗本質(zhì)上是熒光雙染技術(shù),也可以結(jié)合生物信息學(xué)方法預(yù)測蛋白質(zhì)的亞細胞定位。