熒光定量PCR儀的相關介紹

PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)方式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)方式生成模板，從而進入平臺期。在傳統(tǒng)的PCR 中，常用凝膠電泳分離并用熒光染色來檢測PCR反應的終擴增產(chǎn)物，因此用此終點法對PCR產(chǎn)物定量存在不可靠之處。

在real-time Q-PCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的監(jiān)測和連續(xù)地分析擴增相關的熒光信號，隨著反應時間的進行，監(jiān)測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲 線。在PCR反應早期，產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別，而后熒光的產(chǎn)生進入指數(shù)期、線性期和終的平臺期，因此可以在PCR反應處于指數(shù)期的某一點 上來檢測PCR產(chǎn)物的量，并且由此來推斷模板當初的含量。

熒光定量PCR儀Ct值的含義

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每個反應管內(nèi)的熒光信號達到設定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。研究表明，每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的 對數(shù)存在線性關系，起始拷貝數(shù)越多，Ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標準品可作出標準曲線，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標準曲線上計算出該樣 品的起始拷貝數(shù)。

熒光定量PCR儀的相關應用

血液檢驗

漏檢率由于實時熒光定量PCR方法比Elisa靈敏很多，因此，血站或血液研究所一般用來研究Elisa方法的漏檢率，即分析Elisa方法測定為陰性的血樣，再用實時熒光定量PCR方法來復檢。復檢時，一般24個Elisa陰性的血樣混合成一個樣本進行檢測。上海用此方法在用于血液制品的血液中發(fā)現(xiàn)一例HIV，后經(jīng)測定供血者，證實人的確是HIV陽性。北京市紅十字血液中心正在測定北京血站中5萬份Elisa陰性血樣的漏檢率。由于不同地區(qū)所用的Elisa試劑、方法、批號等都不相同，因此不同地區(qū)都有必要進行這一工作。

熒光定量PCR儀的部分應用

萊普特科學儀器（北京）有限公司是一家專業(yè)從事實驗儀器生產(chǎn)、銷售和服務的企業(yè)。我們您分析該行業(yè)的以下信息。

新的愈后指標的研究

對于疾病，在藥作用至一定程度后，就認為可以停藥了，但是應該在什么停藥，現(xiàn)在大都沒有一個明確的指標，現(xiàn)在所用的指標由于受到檢測方法的靈敏度及準確性限制，這一指標未必合理，因此有必要對治好的指標以及指標與發(fā)率以及疾病轉(zhuǎn)化為其他疾病之間的關系等進行進一步的研究，從而為藥或療法徹底治好疾病打下堅實的理論基礎。