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發(fā)布時間:2021-05-13 07:33  
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廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。SPE柱規(guī)格
在選擇固相萃取機理時,應(yīng)根據(jù)目標化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機理,因為許多化合物同時具有多種功能基。例如:2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16),它在一定 pH條件下也可呈陽離子態(tài),同時它又具有疏水性和親水性的非極性官能團。此時,應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況,選擇有利于從干擾物中分離目標化合物的萃取機理。當樣品基質(zhì)中同時含有大量非極性干擾雜質(zhì)時,應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機制,而應(yīng)采用以 pKa以下兩個 pH單位或以 pH=2.16為限的陽離子交換機制。相反,如果樣品中同時含有大量干擾雜質(zhì)陽離子,則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高),采用非極性萃取機制更為有利。
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骨架形狀,粒徑,孔徑
硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無定型C18材料具有較高的性能價格比,是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性,但相對價格可能稍高,可作為精制的選擇。
現(xiàn)在市場上可供選擇的填料粒徑很多,中低壓備通常是為了增大上樣量,增加流速,減小壓力而選用大粒徑填料;由于可以達到較高的柱效,因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時還應(yīng)充分考慮孔徑,分子量小于5000 da時選擇孔徑(80~120 da),而對于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品,通常不采用C18分離模式,采用 SEC等模式進行分離。
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對正相體系,先對目標化合物的正己烷溶液進行上樣,然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正己烷溶液對目標化合物進行洗脫,分別收集洗脫液的分析結(jié)果,建立淋洗曲線,確定目標化合物洗脫后的溶劑體系,淋洗后的甲1基叔丁基1醚含量應(yīng)略低于目標化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲1基叔丁基1醚的含量應(yīng)略高于目標化合物正好被洗脫時的溶劑體系。
合理處理 SPE柱,在 SPE柱中,吸附劑可能存在少量干擾物,有效活化可避免干擾物進入洗脫液中,活化溶液應(yīng)選擇整個洗脫過程中洗脫強度zui高的溶劑體系。
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樣本制備問題
大部分流速問題是由于樣品制備不當造成的。例如樣品混濁、離心過濾不充分造成上樣時篩板堵塞,或樣品本身的蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)處理不當,造成有效蛋白沉降,造成篩板堵塞。通過改進前處理方法,可解決由這種原因引起的流速問題。因此,樣品準備是保證 SPE正常流動速度的di一步。
小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)
充填粒徑的作用,大充填粒徑的充填越疏松,流動相阻力越小,流速越快;小充填粒徑的作用,充填越緊,流速越慢。這一現(xiàn)象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um,農(nóng)殘級弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um,大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會比一般小柱要快,特別是大孔硅藻土小柱,在使用時需要配以導(dǎo)流針來控制流速。
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固相萃取產(chǎn)品采用高度均勻的聚合物微球和二氧化硅微球作為固相萃取材料的骨架,同時材料本身還具有比表面積大、高密度、功能性團狀等特點,這將顛覆市場上用尺寸不均、形狀不規(guī)則的微球作為固相萃取填料的產(chǎn)品。
均勻顆粒度的固相萃取產(chǎn)物,經(jīng)過同樣體積的淋洗后,可獲得較多的理論塔板數(shù)目,對回收不易分離的化合物有明顯幫助。
反壓小,通過率高,解決了粘性試樣堵塞柱體的問題。粒徑均勻,球形填料,使溶液與固相萃取填料充分接觸,流動速度均勻。
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選擇好 SPE柱的種類之后,我們需要確定 SPE柱的規(guī)格,即 SPE柱的裝填量?,F(xiàn)在,市場上 SPE柱填料的質(zhì)量主要有100 mg,200 mg,300 nag,500 mg,1000 mg等等。膜式 SPE柱比常規(guī) SPE柱填充量小。
通常有20 mg,30 mg,50 mg,100 mg等等。SPE柱按其尺寸分為1 mL、3 mL和6 mL三種。還有8 mL,10 mL甚至更大的 SPE柱,但是這些大體積的 SPE柱在實際中并沒有被廣泛使用。
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固相萃取柱(英文,簡稱 SPE柱,或 Solid Phase extraction Cartridges,簡稱 SPE柱,簡稱 SPE柱)是一種從層析柱中提取、分離和濃縮樣品的前處理設(shè)備。
通常固相萃取柱大多采用聚(PP)為材料的注射針筒裝置,其內(nèi)部裝有兩片塞片,塞片是用聚乙烯(PE)或玻璃纖維制成的,塞片的中間裝有一定量的色譜吸附劑(填料)。固相萃取柱的上端開放,下端為出液口,液體通過吸附劑從出口流出。
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