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發(fā)布時(shí)間:2021-07-12 04:53  
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按照PQR三原則法進(jìn)行評(píng)價(jià)。P指的是Purity(純度),具體而言就是磁珠提取后的核酸中含有多少非核酸類(lèi)的雜質(zhì)殘留,如蛋白、鹽、多糖等。該指標(biāo)通常用吸光度比值(A260/A280和A260/A230)來(lái)衡量。
Q指的是Quality(質(zhì)量),磁珠提取后的核酸尤其是較長(zhǎng)的基因組核酸應(yīng)保持其完整性,不應(yīng)出現(xiàn)斷裂或降解等現(xiàn)象。該指標(biāo)可通過(guò)簡(jiǎn)單的凝膠電泳或者復(fù)雜一些的特定PCR及微流控芯片(如Agilent Bioanalyzer)進(jìn)行評(píng)估。
R指的是Recovery(收率),磁珠提取過(guò)程應(yīng)當(dāng)盡量將所有的核酸都能從樣本中提取出來(lái)。高收率對(duì)于核酸檢測(cè)尤其是疾病早期檢測(cè)的靈敏度至關(guān)重要,在疾病早期,樣本中的病原體核酸含量通常較低,如果不能地提取到所有核酸,那么很容易出現(xiàn)假陰性,導(dǎo)致漏檢。
我們所熟知的宏觀球體如籃球,乒乓球,玻璃珠是如此之普通,而微球只不過(guò)是把這些球體做到足夠“小”而已,為什么中國(guó)這么大的一個(gè)國(guó)家卻做不了。其實(shí)很多技術(shù)的難度都是因?yàn)椤靶 痹斐傻?。芯片之所以難做就是因?yàn)槔锩娴慕Y(jié)構(gòu)要控制到納米尺寸。乒乓球可以很容易通過(guò)模具做出來(lái),而要把乒乓球做到納米和微米范圍的尺度其實(shí)難度是很大的。在微觀尺度下,大家習(xí)以為常的宏觀工具和制作技術(shù)已完全不適用,需要全新的技術(shù)手段,使得宏觀很容易的事情在微觀變成高不可攀的技術(shù)難題。
微球(microspheres)是指分散或被吸附在高分子聚合物基質(zhì)中而形成的微小球狀實(shí)體,其粒徑一般在1—250μm之間 [1] 。由于微球制劑具有長(zhǎng)效緩釋或靶向作用,可以大大提升患者用藥的方便性、依從性,在臨床上已突顯優(yōu)勢(shì),是一種極具潛力的劑型。此外,微球制劑產(chǎn)品附加值較大,市場(chǎng)前景廣闊,近年來(lái)已成為研發(fā)的熱點(diǎn)。
微球的分散可以使用水浴超聲的方式進(jìn)行,這種方式可以有效的使微球分散但又不會(huì)使溶液發(fā)熱,同時(shí)選擇水浴超聲的另一優(yōu)勢(shì)是不會(huì)像探頭插入式超聲那樣因?yàn)槭褂么螖?shù)的增多而導(dǎo)致探頭污染的可能。
我們沒(méi)有發(fā)現(xiàn)偶聯(lián)有蛋白的微球超聲時(shí)會(huì)有什么問(wèn)題,但是需要注意的是如果偶聯(lián)有蛋白的微球超聲時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的話也會(huì)使偶聯(lián)的蛋白脫落。