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細胞實驗外包免疫疾病模型「英瀚斯」

發(fā)布時間:2021-07-15 07:59  

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細胞檢測服務

作為生物體結構和功能的基本單位,細胞在機體的各項新陳代謝的生命活動中發(fā)揮著重要的作用,與此同時,細胞的生理過程,在一定程度上也是機體生命活動的反應。因此利用多種精密儀器,結合特異性的檢測試劑,對體外培養(yǎng)的細胞直接檢測其增殖的基本過程,或對細胞進行不同的處理后檢測細胞生活周期內各項指標的變化,從而深入揭示細胞新陳代謝的具體機制。自噬形成時,GFP-LC3融合蛋白轉位至自噬體膜,在熒光顯微鏡下形成多個明亮的綠色熒光斑點,一個斑點相當于一個自噬體,可以通過計數(shù)來評價自噬活性的高低。








細胞培養(yǎng)中常見的污染及解決方法

原生動物污染

原生動物污染后,細胞培養(yǎng)基變得輕微渾濁。在顯微鏡下,大量的小點來回移動。雖然此時細胞仍能生長,但繁殖速度減慢,細胞生長狀態(tài)不好,邊緣不清,變得不透明。原生動物與細胞形成共生關系。同時,原生動物與細胞競爭營養(yǎng)。破骨細胞標志基因TRAP在共培養(yǎng)3天時開始表達,而MMP-9和CathepsinK則在共培養(yǎng)5天后表達結論共培養(yǎng)體系中成骨細胞對破骨細胞調控作用顯著誘導的破骨細胞具有噬骨能力,該共培養(yǎng)模型可用于成骨細胞和破骨細胞之間的相互調控作用研究。這種共生現(xiàn)象非常普遍,但以細胞為主,因為原生動物的數(shù)量相對較少,因而對細胞的正常生長沒有影響,只有當它們達到一定數(shù)量時,才終爆發(fā)成為循環(huán)。

解決方法:原生動物污染的原因有很多,如液體消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等,如果細胞足夠,果斷丟棄被污染的細胞和復蘇細胞。如果要保留,需要購買使用相關的滅菌試劑。





選擇實驗外包公司需要注意哪些事項?


技術支持

盡量有專門的技術負責對接項目,或者有技術服務群。隨時溝通項目問題,定期匯報實驗進展。這樣能把控實驗進度,結果數(shù)據(jù)有疑問也可以交流,不要實驗做完就沒人管了。


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明確提供實驗原始數(shù)據(jù)、原始圖片,并有保密協(xié)議不外傳數(shù)據(jù)和客戶的信息。確保實驗結果的完整性、唯獨性、真實性。這也是找實驗外包很關心的原則。另外結果盡量有實驗報告形式,包含所用材料、實驗步驟和結果統(tǒng)計分析,方便寫文章時直接使用。另外實驗都是有不確定性的,如果外包公司能保證一定能做出預期的結果,那多半是不靠譜的。2%的瓊脂糖和2xDMEM培養(yǎng)基(含有2x和20%的小牛血l清)混合后,取3mL混合液注入直徑6cm平皿中(10cm平皿加7~10mL),冷卻凝固,可作底層瓊脂置CO2溫箱中備用。做實驗不怕出問題,的外包公司會負責到底,有問題反饋再處理就好。