液相色譜的分離過(guò)程

同其他色譜過(guò)程一樣，HPLC也是溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行的一種連續(xù)多次交換過(guò)程。它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。

開(kāi)始樣品加在柱頭上，假設(shè)樣品中含有3個(gè)組分，A、B和C，隨流動(dòng)相一起進(jìn)入色譜柱，開(kāi)始在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行分配。分配系數(shù)小的組分A不易被固定相阻留，較早地流出色譜柱。分配系數(shù)大的組分C在固定相上滯留時(shí)間長(zhǎng)，較晚流出色譜柱。組分B的分配系數(shù)介于A，C之間，第二個(gè)流出色譜柱。若一個(gè)含有多個(gè)組分的混合物進(jìn)入系統(tǒng)，則混合物中各組分按其在兩相間分配系數(shù)的不同先后流出色譜柱，達(dá)到分離之目的。

不同組分在色譜過(guò)程中的分離情況，首先取決于各組分在兩相間的分配系數(shù)、吸附能力、親和力等是否有差異，這是熱力學(xué)平衡問(wèn)題，也是分離的首要條件。

其次，當(dāng)不同組分在色譜柱中運(yùn)動(dòng)時(shí)，譜帶隨柱長(zhǎng)展寬，分離情況與兩相之間的擴(kuò)散系數(shù)、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動(dòng)相的流速等有關(guān)。所以分離效果則是熱力學(xué)與動(dòng)力學(xué)兩方面的綜合效益。

半制備液相色譜需要哪些

在半制備液相色譜設(shè)備生產(chǎn)中，也有多方面的實(shí)力要求，只有全方面的生產(chǎn)實(shí)力之下，才能保證它的。那么這種儀器需要有哪些方面的生產(chǎn)實(shí)力呢？首先，它需要有更好的生產(chǎn)科技力量。本身這種檢測(cè)儀器就有更高的科技含量，當(dāng)一個(gè)廠家沒(méi)有更好的科技實(shí)力之時(shí)，也就沒(méi)辦法讓其有更好的保證。

市場(chǎng)上面有些儀器在工作之時(shí)沒(méi)有更多功能，在分析中沒(méi)有更好的適應(yīng)性，同時(shí)在整個(gè)靈敏性上也有一定的下降，更多的都是受到生產(chǎn)商的科技實(shí)力不足。之所以很多品牌產(chǎn)品能受到用戶的喜歡，正是因?yàn)樗目萍紝?shí)力強(qiáng)。再者，就是在這種產(chǎn)品的生產(chǎn)中，也需要很好的設(shè)計(jì)實(shí)力，這種產(chǎn)品的使用過(guò)程中，有什么樣的方便性，是不是在外形上有更小的體積，也都是受到這方面的影響。

液相色譜理論

發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱(chēng)高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也稱(chēng)現(xiàn)代液相色譜。

液相色譜和氣相色譜相比較，在以下幾個(gè)方面具有優(yōu)越性

（1）氣相色譜不適用于不揮發(fā)物質(zhì)和對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)，而液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。有些樣品因?yàn)殡y以汽化而不能通過(guò)柱子，熱不穩(wěn)定的物質(zhì)受熱會(huì)發(fā)生分解，也不適用于氣相色譜法。這使氣相色譜法的使用范圍受到了限制。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前氣相色譜法所能分析的有機(jī)物，只占全部有機(jī)物的15%～20%。另一方面，液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。所以液相色譜非常適合于分離生物、醫(yī)學(xué)有關(guān)的大分子和離子型化合物，不穩(wěn)定的天然產(chǎn)物，種類(lèi)繁多的其它高分子及不穩(wěn)定的化合物。

（2）對(duì)于很難分離的樣品，用液相色譜常比用氣相色譜容易完成分離

（3）和氣相色譜相比，液相色譜對(duì)樣品的回收比較容易，而且是定量的，樣品的各個(gè)組分很容易被分離出來(lái)。因此，在很多場(chǎng)合，液相色譜不僅作為一種分析方法，而且可以作為一種分離手段，用以提純和制備具有中等純度的單一物質(zhì)。在氣相色譜中所分離出的各樣品組分雖也可以回收，但一般都不太方便，而且定量性差。液相色譜法由于具有這些氣相色譜法不具備的優(yōu)點(diǎn)，因此在許多領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。