武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學技術服務、技術咨詢及產品開發(fā)的生物技術服務企業(yè)。然后分別鋪篩選平板使細胞長成菌苔（lawn），再將兩種菌苔復印到同一個三重篩選平板上，原則上只有誘餌和靶蛋白發(fā)生了相互作用的二倍體細胞才能在此平板上生長。公司坐落于武漢光谷，由3位歸國博士領銜創(chuàng)辦。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺?，F憑借自身技術特色，依托光谷生物城技術產業(yè)優(yōu)勢，面向全國提供的生物技術服務。

經過改造帶有HIS3報道基因的酵母細胞，只有當HIS3被啟動表達才能在缺乏組氨酸的選擇性培養(yǎng)基上生長。HIS3報道基因的轉錄表達是由“誘餌”和“獵物”的相互作用所啟動的。大多數雙雜交系統(tǒng)往往同時使用兩個甚至三個報道基因，其中之一是 LacZ。這些改造后的基因在啟動子區(qū)有相同的轉錄因子結合位點，因此可以被相同的轉錄因子（如上述的Gal4蛋白）。

武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學技術服務、技術咨詢及產品開發(fā)的生物技術服務企業(yè)。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺?，F憑借自身技術特色，依托光谷生物城技術產業(yè)優(yōu)勢，面向全國提供的生物技術服務。

FISH：采用了已知序列的、特異性的單鏈核酸作為探針，標記了生物素或熒光素，在一定的溫度和離子濃度下通過堿基互補配對法則，使得DNA-DNA原位雜交，采用熒光法顯示，將DNA在細胞爬片、組織切片(石蠟切片or冰凍切片)的原始位置上標記出來的一種技術。對分散在若干個瓊脂平板上的少數菌落（100-200）進行篩選時，可采用該方法。

原位雜交在前。

（1）常規(guī)脫蠟入水。

（2）37℃蛋白酶K消化20min，37℃漂洗液充分洗去蛋白酶K。

（3）滴加探針，加蓋玻片，避光、濕盒、37℃過夜孵育。

（4）如果試劑盒允許的話，將試劑盒中洗脫液水浴加溫至37℃震蕩洗脫多余的探針。

（5）加堿性磷酸酶標記的抗1體，37℃孵育半小時，洗去抗1體后顯色。

免1疫組化在后。

（1）將顯色后確認為陽性的切片充分漂洗。

（2）在PH為6.0的枸櫞酸鈉溶液中，微波至96℃左右，作用10min。

（3）滴加一抗，37℃濕盒孵育2h。

（4）充分漂洗切片，滴加二抗，室溫下孵育40-50min。

（5）DAB顯色后，采用PBS中止顯色反應。

（6）不要復染核，不然就蓋住原位雜交信號了。