廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。NH2固相萃取柱類型

什么固時候脫水？

激1活平衡溶液，上樣液體無需抽干

其主要目的有兩個，一個是清洗填料，洗去填料內(nèi)部的底面，另一個是促進(jìn)鍵合分子的展開。在某些長鏈的官能團(tuán)中，如C18在干燥填料中不能完全展開，而活化可使填料官能團(tuán)濕潤伸展，使其對目標(biāo)化合物保持較大吸附活性。因此，激1活平衡過程并不需要進(jìn)行抽水。

淋巴1結(jié)需抽干主要有兩個原因：

②一般淋洗液與洗脫液的極性差異會很大(如淋洗液為水，洗脫溶劑為正己烷或二氯甲1烷)，兩種溶劑不能互溶或溶解，從而造成洗脫液流不下或流速慢，妨礙洗脫溶劑與目標(biāo)物接觸，洗脫效果差，回收率低。

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所分析的目標(biāo)化合物必須具有下列一種或多種功能基團(tuán)，才能通過離子作用力從樣品溶液中分離出來。

(1)可產(chǎn)生陽離子(帶正電荷)的功能(2)可產(chǎn)生陰離子(帶負(fù)電荷)的功能

此外，所分析的目標(biāo)化合物必須在一定 pH條件下才能發(fā)生離子化或中性化反應(yīng)。為了有效地利用離子交換機(jī)理在 SPE柱中吸附目標(biāo)化合物，需要滿足兩個條件：

目標(biāo)化合物中的離子與吸附劑基團(tuán)中的離子態(tài)帶相反電荷；

(2)萃取環(huán)境中的 pH必須使目標(biāo)化合物和吸附物上的功能基團(tuán)同時帶電；

(3)萃取環(huán)境中不得含有高濃度的競爭化合物，其電荷與目標(biāo)化合物相同。

實踐中，為了滿足前兩個條件，以保證99%以上的目標(biāo)化合物和固相萃取吸附劑表面的官能團(tuán)可以呈離子型或中性型，應(yīng)根據(jù)樣品或 SPE柱吸附劑官能團(tuán)的 pKa值來調(diào)整 pH值。

相對于弱酸性化合物而言，弱堿性化合物在陽離子交換固相萃取過程中99%的分解都是陽離子，這一弱堿性化合物所處的環(huán)境系統(tǒng)的 pH值必須低于其 pKa至少兩個 pH單位。洗脫時，環(huán)境體系的 pH值應(yīng)高于化合物的 pKa值至少兩個 pH單位，99%的化合物此時為中性狀態(tài)，可通過適當(dāng)?shù)娜軇年栯x子交換柱中洗脫。

選擇離子交換固相萃取柱的種類：為能有效地洗脫吸附在一起的離子化合物，對于含有強(qiáng)離子官能團(tuán)的目標(biāo)化合物，一般選用弱離子交換柱；對于含有弱離子官能團(tuán)的化合物，一般選用強(qiáng)離子交換柱。該方法可避免目標(biāo)化合物與吸附劑官能團(tuán)同時處于離子化狀態(tài)，使目標(biāo)化合物始終保持在不能洗脫的保留狀態(tài)。

反相式C18分離柱

C18是十八烷基碳鏈上的反相固定相的統(tǒng)稱。除以普通硅膠為基質(zhì)外，以C18鏈為基質(zhì)的高聚物小球、氧化鋁、氧化鋯等反相固定相，均可稱為C18鏈。有很多種類型的C18，常見的C18是硅膠基質(zhì)，稱為 ODS,C18能夠在純水中工作，被稱為C18-AQ。

C18反相柱的固定相為非極性固定相，流動相極性大于固定相極性，常用的溶劑一般為水和甲1醇、乙1腈、四氫呋1喃、異丙1醇等與水互溶的溶劑，適合分離非極性或弱極性的化合物，其洗脫順序一般為樣品極性從高到低。

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1.在全球市場上，2018年全球色譜柱產(chǎn)量為3785.7千根，比2013年的3096.5千根有所增加，由美國主導(dǎo)，占全球色譜柱產(chǎn)量的45.90%。作為第二大區(qū)域市場的歐洲，占全球產(chǎn)量的24.23%?，F(xiàn)在主要的色譜柱生產(chǎn)商集中在安捷倫公司，沃特世公司，島津公司，世1界領(lǐng)1先的 ThermoFisher公司，它在2018年的市場占有率為22.01%，位居di一。

2.美國是色譜柱消費(fèi)zui多的地區(qū)，2018年1448.7千根色譜柱的消費(fèi)量占全球的38.27%，其次是歐洲的29.78%。

三、色譜柱可分為氣相色譜柱、液相色譜柱和 SPE固相萃取小柱，在全球范圍內(nèi)，液相色譜柱的產(chǎn)量占很大比例，2018年為2494千根，占65.88%。其中，氣相色譜柱的產(chǎn)量占24.74%, SPE固相萃取柱的產(chǎn)量占9.38%。

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SPE檢測方法獨立于分析方法， SPE檢測方法僅供后續(xù)分析使用。二、為了使樣品溶液與填料充分接觸，溶劑流量不得過大。三、可以用自動化儀器來完成。該儀器主要由柱架、柱塞泵、貯液槽、管道和處理樣品的處理機(jī)組成。預(yù)柱處理目的：1.去除可能存在于填料中的雜質(zhì)；2.使填料溶出，提高固相萃取的可再生性

建立 SPE方法1.為了防止分析物損失，樣品中的溶劑濃度不宜過高；2.采用反相萃取法，樣品用水或緩沖劑作溶劑，其中有機(jī)溶1劑含量不超過10%;3.為克服加樣過程中分析物損失的問題，可采用弱溶劑稀釋樣品，減少樣品體積，增加 SPE柱中的填料，并選擇對分析物保留較強(qiáng)的吸附劑等措施。

為了有效地利用離子交換機(jī)理在 SPE柱中吸附目標(biāo)化合物，需要滿足兩個條件：

實踐中，為了滿足前兩個條件，以保證99%以上的目標(biāo)化合物和固相萃取吸附劑表面的官能團(tuán)可以是離子化或中性化狀態(tài)，樣品或 SPE柱的 pH應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和固相萃取吸附劑表面官能團(tuán)的 pKa值來調(diào)整。

反相層析技術(shù)目前在 HPLC中應(yīng)用zui為廣泛，主要是因為它適用于分析絕大多數(shù)非極性物質(zhì)，以及大量可離子化的離子化合物。

反相層析包括什么？除了一些常見的固定相C18,C8,C4,C2,C1, CN,NH2和 Phenyl之外，還存在一些分支類型，如混合相固定相(如苯i基-己基)，填充類型，在封尾和未封尾中極性內(nèi)嵌固定方式等。在反相色譜中也使用了許多其他的填料，包括聚合物、聚合型硅膠和聚合型氧化鋁、無機(jī)-有機(jī)雜化物、涂層氧化鋯和石墨化碳等。這些固定相各有其優(yōu)缺點。色譜柱受污染時，與未受污染的色譜柱有一定區(qū)別。反相色譜柱受到污染會產(chǎn)生反壓問題，必須進(jìn)行清洗和再生以恢復(fù)或接近原始狀態(tài)。