廣州碩譜生物科技有限公司氧化鋁SPE柱規(guī)格

反相萃取吸附機(jī)理。

反相作用機(jī)理：

對(duì)于通過(guò)非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標(biāo)化合物，可以用具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫，如氯1仿、環(huán)1己烷、乙1酸乙酯等。只要溶劑的洗脫強(qiáng)度足以破壞目標(biāo)化合物與吸附劑非極性官能團(tuán)之間的范德華力，就可以順利地將目標(biāo)化合物從SPE柱上洗脫下來(lái)。即便是極性較強(qiáng)的甲1醇，對(duì)于許多化合物來(lái)說(shuō)也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時(shí)單一溶劑不能把疏水性強(qiáng)的目標(biāo)化合物完全洗脫下來(lái)，則可考慮使用二氯1甲1烷：乙1酸乙酯（1：1，體積比）。

色譜柱維護(hù)-反相柱

樣品

zui好將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，zui好使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑（例如，流動(dòng)相為水，樣品溶劑為甲1醇），為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）。

常見(jiàn)反相鍵合硅膠吸附劑的類(lèi)型

C8柱

C8柱的主要官能團(tuán)辛基( octyl)。其主要作用力是非極性，第二作用力是極

性、陽(yáng)離子交換。C8的性質(zhì)與C18十分相近，但由于其支鏈烷烴沒(méi)有C18長(zhǎng)，所以對(duì)非極性化合物的吸附能力沒(méi)有C18強(qiáng)。正因?yàn)槿绱?，?duì)于一些在C18上吸附太強(qiáng)而難以洗脫的化合物，可以用C8來(lái)取代。因?yàn)镃8的碳鏈較短，不能覆蓋硅膠的表面，其極性作用力比C18要強(qiáng)。盡管如此，極性作用力依然不是C8的主要作用力。

淋洗液和洗脫液的優(yōu)化對(duì)于反相模式和正相模式，應(yīng)在不影響回收率的前提下，增大淋洗液洗脫的強(qiáng)度并降低洗脫液的洗脫強(qiáng)度。

對(duì)于反相模式，可將目標(biāo)化合物的水溶液上樣，然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的甲1醇水溶液洗脫，分別收集洗脫液分析，建立淋洗曲線，找出目標(biāo)化合物被洗脫時(shí)的溶劑體系，淋洗液中甲1醇的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時(shí)的溶劑體系，而洗脫液中甲1醇的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被完全洗脫時(shí)的溶劑體系；當(dāng)純甲1醇不能洗脫目標(biāo)化合物時(shí)，應(yīng)試驗(yàn)甲1醇-甲1基shu丁基醚混合溶液的洗脫曲線；對(duì)于某些既不溶于水也不溶于甲1醇的離子型化合物，可以在溶劑體系中加入酸或堿。

C2柱

C2柱的官能團(tuán)是乙1基( ethyl)。其主要作用力是非極性、極性，第二作用力是陽(yáng)離子交換。因?yàn)镃2的碳鏈?zhǔn)侄?，使得硅膠上的硅羥基(Si-OH)較為暴露在吸附劑表面，從而導(dǎo)致C2具有相當(dāng)顯著的極性特點(diǎn)。在實(shí)際應(yīng)用中，如果目標(biāo)物在C8或C18上吸附作用太強(qiáng)，可用C2來(lái)取代。C2的極性作用力比CN的略強(qiáng)。

什么是SPE柱SPE柱是在分析前處理中，用于凈化樣品的一種色譜耗材，由于樣品處理液中經(jīng)常會(huì)有大量的雜質(zhì)（樣品基質(zhì)），因此對(duì)分析結(jié)果可能會(huì)造成較大的影響，因此針對(duì)待測(cè)化合物的特性，選擇適當(dāng)?shù)腟PE柱能有效凈化樣品中的雜質(zhì)。

SPE柱的類(lèi)型

SPE柱的凈化原理是根據(jù)待測(cè)化合物和雜質(zhì)在柱中填料的保留能力差異，起到分離的作用，這也是色譜的重要原理之一。

通常，根據(jù)待測(cè)化合物和填料之間作用力的不同，SPE柱的填料大致分為幾個(gè)類(lèi)型，離子交換、HLB（脂性二乙烯苯和親水性N-乙烯基吡咯烷酮）、C18、硅膠、弗羅里硅土、中性氧化鋁等，而作用力大致包括離子鍵、氫鍵和范德華力。根據(jù)不同的作用力，SPE可選擇吸附待測(cè)化合物或者雜質(zhì)。

若取下立柱放置一段時(shí)間，需要采取什么保護(hù)措施？

答：對(duì)于一般的反相柱子，即清洗后將柱子兩頭放入純甲1醇或80%左右的甲1醇(乙1腈)水中，然后用堵頭塞緊柱子兩頭，以免溶劑揮發(fā)，應(yīng)不需作特殊保護(hù)。

流動(dòng)相中加入適量四氫呋1喃能改善峰形的機(jī)理是什么？

答：《HPLC方法與應(yīng)用》一書(shū)于世林編著上書(shū)：甲1醇為質(zhì)子提供體，乙1腈為質(zhì)子接受體，四氫呋1喃為偶極溶劑，除極性影響外，還應(yīng)存在其他影響因素，至于分離機(jī)理，仍較為復(fù)雜，不能將其視為全能方法。

一般實(shí)驗(yàn)室，在少量樣品時(shí)，處理主要是以手工操作為主，常用的簡(jiǎn)易設(shè)備如，真空抽濾：

還有一些，通過(guò)連接溶劑系統(tǒng)，處理大量液態(tài)樣品或洗脫液。

這種手工處理樣品只適合少量樣品，當(dāng)個(gè)樣品量較大時(shí)，手工處理就顯得繁瑣而且花費(fèi)很多時(shí)間，同時(shí)樣品間的均一性差異較大。

另外，一般實(shí)驗(yàn)室常用的真空方法，會(huì)遇到很多實(shí)際問(wèn)題，如：過(guò)濾速度不均、粘稠液體不通過(guò)，個(gè)別樣品可能還需要手工輔助處理，造成分析方法的變異較大。

所以現(xiàn)在一般都常用正向加壓的方法，目前，這是一種主流方法，使用范圍廣，均一性好。