磷酸化酶的性質(zhì)

糖基轉(zhuǎn)移酶類下的一個(gè)組群，即專司催化磷酸解作用的一類酶總稱。廣泛分布于動(dòng)物(肝、肌)、植物、微生物中，包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase，EC2.4.1.1，分子量3.7×105)、麥芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.30.)、海帶二糖磷酸化酶(1aminaribiose phosphorylase EC 2.4.1.31.)、纖維糊精磷酸化酶(EC2.4.1.49.)、1，3-β-D-葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.97.)、嘧1啶核苷磷酸化酶(EC2.4.2.2.)、尿苷磷酸化酶(EC2.4.2.3.)、胸腺嘧1啶磷酸化酶(EC2.4.2.4.)、鳥(niǎo)苷磷酸化酶(EC2.4.2.15.)等。例如很有代表性的磷酸化酶是糖原磷酸化酶，糖原在體內(nèi)降解過(guò)程中，該酶是催化糖原還原性末端葡萄糖殘基的d-1,4-糖苷鍵斷裂，反應(yīng)，生成1-磷酸葡萄糖和少了一個(gè)葡萄糖基的糖原分子(見(jiàn)圖)。這類酶多數(shù)是作為生化試劑應(yīng)用于研究。

低堿性磷酸酶血癥的癥狀存在異質(zhì)性，其臨床癥狀多樣，需要及時(shí)進(jìn)行cure

典型癥狀

1、單純牙型乳牙會(huì)出現(xiàn)早期脫落的情況，僅僅表現(xiàn)出牙齒受累的癥狀表現(xiàn)。

2、圍生期型患者會(huì)出現(xiàn)四肢短小的癥狀，主要因?yàn)閲?yán)重骨骼礦化不足，然后造成骨骼系統(tǒng)異常的癥狀表現(xiàn)。

3、良性新生兒型患者會(huì)出現(xiàn)骨骼畸形的情況，比如漏斗胸，以及身材矮小的癥狀，但是這種類型的癥狀，在出生以后可以達(dá)到改善。

4、嬰兒型患者會(huì)出現(xiàn)牙齒早脫的癥狀，通過(guò)X-ray檢查，可以顯示未成熟牙齒早失的癥狀，如果出現(xiàn)佝僂病的情況，患者會(huì)出現(xiàn)胸廓畸形、頭顱畸形的癥狀，患者的囟門會(huì)變得寬大，但是常常會(huì)出現(xiàn)顱縫早閉的情況。

遺傳控制中大的困難并不是DNA的，而是需要被的特異DNA段的分離 [2]  。如果以基因?yàn)槟康?，特異DNA段的分離將大大有助于獲得與遺傳信息同樣多的相關(guān)的基因產(chǎn)物，一般說(shuō)這些基因產(chǎn)物均為蛋白質(zhì)多肽，因此抗該蛋白質(zhì)的對(duì)于測(cè)定和沉淀蛋白質(zhì)及其前體有重要用途，甚至可用于了解蛋白質(zhì)分子量 [2]  。AMV反轉(zhuǎn)錄酶和MLV反轉(zhuǎn)錄酶都必須有引物來(lái)起始DNA的合成。cDNA合成的引物是與真核細(xì)胞mRNA分子3’端poly（A）結(jié)合的12～18個(gè)核苷酸長(zhǎng)的oligo（dT）。

所有合成cDNA條鏈的方法都要用依賴于RNA的DNA聚合酶(反轉(zhuǎn)錄酶)來(lái)催化反應(yīng)，主要有兩個(gè)關(guān)鍵因素，一個(gè)是mRNA模板，另一個(gè)是反轉(zhuǎn)錄酶 [3]  。商品化反轉(zhuǎn)錄酶有從禽類成髓細(xì)胞瘤病毒純化到的禽類成髓細(xì)胞病毒（AMV）逆轉(zhuǎn)錄酶和從表達(dá)化的Moloney鼠病毒反轉(zhuǎn)錄酶基因的大腸中分離到的鼠病毒（MLV）反轉(zhuǎn)錄酶。AMV反轉(zhuǎn)錄酶包括2個(gè)具有若干種酶活性的多肽亞基，這些活性包括依賴于RNA的DNA合成，依賴于DNA的DNA合成以及對(duì)DNA-RNA雜交體的RNA部分進(jìn)行內(nèi)切降解（RNA酶H活性）。MLV反轉(zhuǎn)錄酶只有單個(gè)多肽亞基，兼?zhèn)湟蕾囉赗NA和依賴于DNA的DNA合成活性，但降解DNA—RNA雜交體中的RNA的能力較弱。且其熱穩(wěn)定性較AMV反轉(zhuǎn)錄酶差。MLV反轉(zhuǎn)錄酶能合成較長(zhǎng)的eDNA（如大于2～3kb）。AMV反轉(zhuǎn)錄酶和MI。V反轉(zhuǎn)錄酶利用RNA模板合成cDNA時(shí)的適pH、適鹽濃度和適溫度各不相同．所以合成鏈時(shí)相應(yīng)調(diào)整條件是非常重要的。