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發(fā)布時(shí)間:2021-08-08 03:45  
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按照PQR三原則法進(jìn)行評(píng)價(jià)。P指的是Purity(純度),具體而言就是磁珠提取后的核酸中含有多少非核酸類(lèi)的雜質(zhì)殘留,如蛋白、鹽、多糖等。該指標(biāo)通常用吸光度比值(A260/A280和A260/A230)來(lái)衡量。
Q指的是Quality(質(zhì)量),磁珠提取后的核酸尤其是較長(zhǎng)的基因組核酸應(yīng)保持其完整性,不應(yīng)出現(xiàn)斷裂或降解等現(xiàn)象。該指標(biāo)可通過(guò)簡(jiǎn)單的凝膠電泳或者復(fù)雜一些的特定PCR及微流控芯片(如Agilent Bioanalyzer)進(jìn)行評(píng)估。
R指的是Recovery(收率),磁珠提取過(guò)程應(yīng)當(dāng)盡量將所有的核酸都能從樣本中提取出來(lái)。高收率對(duì)于核酸檢測(cè)尤其是疾病早期檢測(cè)的靈敏度至關(guān)重要,在疾病早期,樣本中的病原體核酸含量通常較低,如果不能地提取到所有核酸,那么很容易出現(xiàn)假陰性,導(dǎo)致漏檢。
磁性微球在細(xì)胞標(biāo)記和細(xì)胞分離上的應(yīng)用
細(xì)胞分離是生物細(xì)胞學(xué)研究中一種十分重要的技術(shù),的細(xì)胞分離在細(xì)胞分離是生物細(xì)胞學(xué)研究中一種十分重要的技術(shù),的細(xì)胞分離在臨床中是首要的、重要的步驟。這種細(xì)胞分離技術(shù)在臨床診斷上有廣范的應(yīng)用,例如需在輻射前將抽出,且要將癌細(xì)胞從液中分離出來(lái)。
傳統(tǒng)的細(xì)胞分離技術(shù)主要采用離心法,利用密度梯度原理進(jìn)行分離,時(shí)間長(zhǎng)、效果差。隨著合成磁性微球的發(fā)展,磁性微球在分離細(xì)胞方面已經(jīng)獲得了快速的發(fā)展,經(jīng)動(dòng)物臨床試驗(yàn)已獲成功。其中重要的是選擇一種生物活性劑或者其他配體活性物質(zhì)(如、熒光物質(zhì)、外源凝結(jié)素等),根據(jù)細(xì)胞表面糖鏈的差異,使其僅對(duì)特定細(xì)胞有親和力,從而達(dá)到分離、分類(lèi)以及對(duì)其種類(lèi)、數(shù)量分布進(jìn)行研究的目的。
用于緩釋系 統(tǒng)中貯存或送達(dá)的生物陶瓷微球??梢岳闷涮厥獾奈?理、化學(xué)或生物學(xué)性質(zhì)在靶位釋放、線或熱量等,以達(dá) 到佳目的。例如,含有線同位素gOY的三氧化二 憶一硅鋁酸鹽玻璃微球(直徑約25拜m),可通過(guò)動(dòng)脈注射,借助 于血流將其帶至肝部位(供血量為正常組織3倍以卜)富 集;以半衰期64卜,在25一3mm局部范圍內(nèi)釋放高達(dá) 15o00rd(150 Gy)劑量的日射線,致死細(xì)胞,而不造成正 常組織細(xì)胞的大量。
改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的方法制備熒光-磁性雙功能納米球,并用粘度分析法和原子發(fā)射光譜分析法實(shí)現(xiàn)微球濃度、微球內(nèi)部點(diǎn)和磁性納米粒子包埋量的表征;在熒光-磁性雙功能納米球表面偶聯(lián)上蛋白后,采用熒光定量分析法表征微球表面蛋白偶聯(lián)個(gè)數(shù),并將構(gòu)建的熒光-磁性-生物靶向三功能納米球用于A549細(xì)胞的識(shí)別和分選。構(gòu)建熒光-磁性雙編碼微球,并用于體系中多組分的同時(shí)識(shí)別和梯度分選。采用超聲溶脹的方法,將不同顏色的點(diǎn)和不同量的磁性納米粒子包埋到聚苯乙烯-酰胺共聚微球內(nèi)部,從而構(gòu)建了一組熒光-磁性-雙編碼微球,分別在其表面偶聯(lián)上不同的后用于復(fù)雜樣品中三種靶向蛋白的同時(shí)識(shí)別和分離。