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發(fā)布時間:2021-08-29 04:03  
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雙夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
終止液(3M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸餾水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物緩沖液(PH5.5) 1ml3%H2O2 2μl(8) 抗原、和酶標(biāo)記。(9) 正常人和陽性對照。