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色譜柱的使用與維護(hù)色譜柱的正確使用與維護(hù)非常重要，一不小心就會(huì)降低柱效，縮短使用壽命，甚至損壞。為了維護(hù)色譜柱，在進(jìn)行色譜分析時(shí)，必須注意以下問(wèn)題。調(diào)整流量過(guò)快…防止壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動(dòng)。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會(huì)影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會(huì)對(duì)柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時(shí)，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭?。前柱與保護(hù)柱…為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相(特別是 pH)。有時(shí)候，一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，或者在進(jìn)樣器與色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般為填充具有相似固定相的短柱?？梢砸矐?yīng)該經(jīng)常更換保護(hù)柱。

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如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動(dòng)，跳動(dòng)范圍約10 bar。對(duì)策：原來(lái)的小白頭有點(diǎn)臟，換了之后還沒(méi)有解決；2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出后，發(fā)現(xiàn)類(lèi)似氣泡存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒(méi)有跳動(dòng)，觀察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決。

用不同的方法對(duì)色譜柱會(huì)有不同的要求，但是每一種色譜柱都有其清潔要求，這在色譜柱上可以找到，必須按照以上的要求來(lái)進(jìn)行，否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱效下降，色譜柱的使用壽命縮短，檢測(cè)波長(zhǎng)會(huì)因品種的不同而有不同的要求，這里需要指出的是要注意觀察檢測(cè)器燈能量的變化，如基線(xiàn)波動(dòng)大，活性成分的響應(yīng)值突然變小等，對(duì)檢測(cè)器電鏡能量的變化，要注意觀察到檢測(cè)器中能量的變化，如基線(xiàn)波動(dòng)大，活性成分的響應(yīng)值突然變小等，有可能是由于燈的能量不足導(dǎo)致的，所以實(shí)際使用時(shí)要根據(jù)實(shí)際情況更換。流動(dòng)速度也因品種而異，一般為1.0 ml/min，流速不能隨意改變，尤其作為 QC人員，但作為研發(fā)人員，有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證，會(huì)改變流速來(lái)評(píng)估該方法的適用性。對(duì)不同品種的進(jìn)樣量也有不同的規(guī)定，進(jìn)樣量這個(gè)現(xiàn)在都是自動(dòng)進(jìn)樣，所以進(jìn)樣精密度都是很好的，不用特別強(qiáng)調(diào)。

操作員：，作為液相操作人員，必須認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想說(shuō)明書(shū)，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常維護(hù)，掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規(guī)程也是由操作人員起草的，因此只要嚴(yán)格按照操作要求操作，一般都不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，當(dāng)然對(duì)液相的日常維護(hù)維護(hù)來(lái)說(shuō)，特別是對(duì)液相的日常維護(hù)保養(yǎng)來(lái)說(shuō)，要注意的是液相的日常維護(hù)保養(yǎng)，泵密封墊的清洗、系統(tǒng)的清洗、溶劑過(guò)濾頭的清洗等方面都不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，尤其是對(duì)液相的日常維護(hù)，不會(huì)造成不必要的麻煩。第二，操作者在配制液相分析樣品時(shí)，好由同一人單獨(dú)完成，以免不必要的意外誤差。4、液體安裝環(huán)境：儀表應(yīng)盡量安裝在水平位置，遠(yuǎn)離振動(dòng)、電磁干擾的屋內(nèi)，有條件時(shí)盡量把液相數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分開(kāi)，一方面是防止色譜基線(xiàn)噪聲太大、基線(xiàn)不穩(wěn)等，一方面是為了減少對(duì)人體的危害。

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固相萃取柱：固相萃取是一種應(yīng)用廣泛、廣受歡迎的樣品前處理技術(shù)，它是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附、與樣品基體及干擾物分離，再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達(dá)到分離富集目標(biāo)化合物的目的。這種方法是在傳統(tǒng)的液-液萃取基礎(chǔ)上，結(jié)合目前廣泛使用的液相色譜和氣相色譜固定相的基礎(chǔ)知識(shí)，利用物質(zhì)相似作用的相似相溶原理開(kāi)發(fā)出來(lái)。

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固相萃取柱提取工藝：

在樣品提取前，要用一整管溶劑沖洗試管，以潤(rùn)濕固相萃取柱填料。反相型硅膠和非極性吸附介質(zhì)，通常用水溶性有機(jī)i溶劑如甲i醇預(yù)處理，然后用水或緩沖溶液。在甲i醇濕吸附劑的表面和滲透性結(jié)合的烷i基相上，使硅膠表面的潤(rùn)濕效率更高。有時(shí)候預(yù)處理溶劑在甲i醇之前使用。這類(lèi)溶劑通常和洗脫溶劑類(lèi)似，主要用于去除固相萃取管中的雜質(zhì)，以及它們對(duì)分析物的干擾，也可能是只溶于強(qiáng)洗脫溶劑。

正相型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常對(duì)樣品所在的有機(jī)i溶劑進(jìn)行預(yù)處理。在樣品加入去離子水或低濃度的離子緩沖溶液中進(jìn)行預(yù)處理，在非極性有機(jī)i溶劑中使用離子交換填料，在樣品加入前應(yīng)保證萃取柱保持濕潤(rùn)。樣品加入前，在萃取柱中干燥填充后，重復(fù)進(jìn)行預(yù)處理過(guò)程。再引入有機(jī)i溶劑前，用水沖洗緩沖液中的鹽份。

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固體萃取柱的應(yīng)用：

單純固相萃取可以手工完成，即在固相萃取柱的上端連接一個(gè)注i射器，萃取柱通過(guò)擠壓將萃取柱中的液體排出。此外，也可采用正壓力或負(fù)壓力的固相萃取設(shè)備對(duì)批量樣品進(jìn)行固相萃取。伴隨著技術(shù)的發(fā)展，樣品量的不斷增加，越來(lái)越多的分析實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始采用自動(dòng)固相萃取儀，尤其是多通道固相萃取儀。

固相萃取儀是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附到樣品基體和干擾物，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附達(dá)到分離目標(biāo)化合物的目的(即樣品的分離、純化和濃縮)，旨在減少樣品基質(zhì)的干擾，提高檢測(cè)靈敏度，其應(yīng)用于各種食品安全檢測(cè)、農(nóng)產(chǎn)品殘留監(jiān)測(cè)、醫(yī)i藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)、商品檢驗(yàn)、自來(lái)水及化工實(shí)驗(yàn)室。

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