實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀

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實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀，由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成，用來(lái)監(jiān)測(cè)循環(huán)過(guò)程的熒光。

與實(shí)時(shí)設(shè)備相連的計(jì)算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過(guò)開發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對(duì)于循環(huán)數(shù)的圖表。

原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實(shí)時(shí)設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正?；幚韥?lái)彌補(bǔ)背景熒光的差異。正?；罂梢栽O(shè)定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。

熒光定量PCR儀的原理

為了便于對(duì)所檢測(cè)樣本進(jìn)行比較，在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期，首先需設(shè)定一定熒光信號(hào)的域值，一般這個(gè)域值（threshold）是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào) （baseline），熒光域值的缺省設(shè)置是3～15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。如果檢測(cè)到熒光信號(hào)超過(guò)域值被認(rèn)為是真正的信號(hào)，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)（Ct）。

熒光定量PCR都有哪些用途呢？

萊普特——熒光定量PCR儀專業(yè)供應(yīng)商，我們?yōu)槟峁┮韵滦畔ⅰ?

新診斷及檢驗(yàn)試劑的開發(fā)

現(xiàn)有的很多診斷及檢驗(yàn)方法都不能同時(shí)滿足快速、靈敏、定量的要求如現(xiàn)有培養(yǎng)法、Elisa法等等，而熒光定量PCR方法以則可以做到這一點(diǎn)，從而可為臨床疾病、商檢、糧油檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、血液檢驗(yàn)等等開發(fā)新的試劑，從而提高檢驗(yàn)的靈敏度、速度及準(zhǔn)確性等；這類試劑的種類是非常多的，所開發(fā)的試劑的社會(huì)效益及經(jīng)濟(jì)效益都是很巨大的。

熒光定量PCR

熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國(guó)Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗(yàn)技術(shù)，它是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。