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降氨氮低溫生物菌種公司承諾守信「在線咨詢」

發(fā)布時間:2021-09-16 07:41  

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如何對微生物進行活化

1 定期移植法的復(fù)蘇較簡單,直接轉(zhuǎn)接即可;

2 液體石蠟法保存的在復(fù)蘇時,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次;

3  沙土管法保存在復(fù)蘇時,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?;蛉∩惩亮S谶m宜的液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面;

4  真空冷凍干燥法保存在復(fù)蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱, 用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現(xiàn)裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,進行適溫培養(yǎng);

5  -80℃ 冰箱凍結(jié)法保存復(fù)蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)快速搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)

6  液氮超低溫凍結(jié)法保存復(fù)蘇與-80℃ 冰箱凍結(jié)法保存復(fù)蘇相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。



                                                      低溫生物的技術(shù)規(guī)程

1、安瓿管或凍存管的準備

用圓底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料凍存管。注意玻璃管不能有裂紋。將凍存管或安瓿管清洗干凈,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。
2、 保護劑的準備
保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,應(yīng)注意其濃度,一般采用10-20%甘油。
3、 微生物保藏物的準備
微生物不同的生理狀態(tài)對存活率有影響,一般使用靜止期或成熟期培養(yǎng)物。
分裝時注意應(yīng)在無菌條件下操作。
的準備可采用下列幾種方法:
刮取培養(yǎng)物斜面上的孢子或菌體,與保護劑混勻后加入凍存管內(nèi);
接種液體培養(yǎng)基,振蕩培養(yǎng)后取菌懸液與保護劑混合分裝于凍存管內(nèi);
將培養(yǎng)物在平皿培養(yǎng),形成菌落后,用無菌打孔器從平板上切取一些大小均勻的小塊(直徑約5-10毫米),真菌取菌落邊緣的菌塊,與保護劑混勻后加入凍存管內(nèi);
在小安瓿管中裝1.2-2毫升的瓊脂培養(yǎng)基,接種,培養(yǎng)2-10天后,加入保護劑,待保藏。
4、 預(yù)凍

預(yù)凍時一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1℃為好、使樣品凍結(jié)到-35℃。




低溫生物的傳代次數(shù)

由于微生物存在著自發(fā)突變,而突變都是在繁殖過程中發(fā)生而表現(xiàn)出來的。所以應(yīng)盡量避免不必要的移種和傳代,把必要的傳代降低到低水平,以降低自發(fā)突發(fā)的機率。傳代次數(shù)越多,產(chǎn)生突變的幾率就越高,因而發(fā)生退化的機會就越多。這要求不論在實驗室還是在生產(chǎn)實踐上,必須嚴格控制的移種傳代次數(shù),并根據(jù)保藏方法的不同,確立恰當(dāng)?shù)囊品N傳代的時間間隔。如同時采用斜面保藏和其它的保藏方式(真空凍干保藏、砂土管、液氮保藏等),以延長保藏時間。






低溫生物德選育和培養(yǎng)

要看你選什么規(guī)模的發(fā)酵是小試還是中試還是生產(chǎn)?另外,你說的選育里應(yīng)該是包括了培養(yǎng)基配制和擴大培養(yǎng)。所以,只能大概列一下。

選育:超低溫冰箱、無菌室、培養(yǎng)箱、搖床、分光光度計、檢測設(shè)備。

培養(yǎng)基配制:電子天平、pH計、滅菌鍋、微波爐、電磁爐、冰箱。

擴大再培養(yǎng):滅菌鍋、搖床、抽濾瓶(或特質(zhì)金屬瓶)、空調(diào)機組、臭氧發(fā)生器。

發(fā)酵:配料罐、種子罐、發(fā)酵罐、補料罐(小試用流加泵)、有時會用到在線監(jiān)測設(shè)備如乙醇檢測儀、生物傳感器、分光光度計等、空壓機、。

分離提純:制水設(shè)備、制冷設(shè)備、濃縮機、細胞破碎儀、離心機、陶瓷膜、真空干燥設(shè)備、超低溫冷干機、造粒設(shè)備(不同產(chǎn)品用到不同的烘干設(shè)備)等,不同工藝所用設(shè)備也不同