做親和柱時，使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同？

Sepharose 4B指4%的瓊脂糖

Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖

他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣，在親和層析色譜中，介質鉸鏈程度越高，化學穩(wěn)定性就應該越高。這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會脫落。越是硬質的介質，耐受的流速也會越高。這樣更節(jié)省平衡洗脫的時間。

親和柱介紹

目前，專用于黃曲霉毒素分離純化的固相萃取產品有兩類:

二是多功能凈化柱(MFC)它是一種特殊的SPE柱，以極性、非極性及離子交換等兒類基團組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質，AFT不被吸附而直接通過，MFC的操作更為簡便，不需要進行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣，10秒鐘內即可完成整個凈化過程，凈化效果理想。

親和柱——親和層析的原理

通常，在開始親和層析前需要預先進行全細胞提取物的粗制，例如細胞裂解液，生長培養(yǎng)基。

首先將固定相裝入帶有流動相的色譜柱中，其中含有某類特定的生物大分子（從DNA到蛋白質，取決于實驗需求）。等待一段時間使兩相充分混合，隨后將洗滌緩沖液倒入色譜柱中。洗滌緩沖液通過破壞非目標生物分子與固定相的較弱結合來去除非目標生物分子。目標生物分子對固定相具有較高的親和力，因此能夠保持與固定相的結合，而不會被洗滌緩沖液沖走。然后將洗脫緩沖液倒入含有剩余目標生物分子的色譜柱中。洗脫緩沖液比洗滌緩沖液，能夠從更大程度上減弱靶生物分子與固定相之間的相互作用，從而洗脫靶生物分子。洗脫得到的溶液包含洗脫緩沖液和目標分子，稱為洗脫液。

固定相一般是凝膠基質，常見的有瓊脂糖。為了防止目標分子與配體結合過程中的空間干擾或重疊，首先將含有烴鏈的抑制連接到瓊脂糖珠（固體支持物）上。這種具有烴鏈的抑制通常被稱為瓊脂糖珠和靶分子之間的間隔基。