親和柱的應(yīng)用

應(yīng)用：牛奶中M1的測定

（參考方法GB 541337-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中M1 的測定）

樣品前處理

稱取50g牛奶到具塞離心管中，在水浴中加熱到35-37℃，4000轉(zhuǎn)離心15min，除去上層乳脂，全部樣品待過柱凈化

樣品過柱凈化

1. 將親和柱（SBHL-20-0245）連接于10ml或50ml注射管下。

2. 將處理好的樣品全部通過親和柱，控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過柱。（注意：空氣不能通過柱體）

3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次，棄去全部流出液，并使2mL-3mL空氣通過柱體。

4. 洗脫，流速為1mL/min-2mL/min，收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測用。

雙酚A檢測新方法——親和柱凈化-液相色譜法

雙酚A，也稱BPA，在工業(yè)上被用來合成聚碳酸酯(PC)和環(huán)氧樹脂等材料。許多科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，雙酚A會(huì)發(fā)揮類似雌素的作用擾亂人體內(nèi)的代謝過程。。我國、歐盟、美國等都禁止其用于嬰幼兒奶瓶。但目前對于雙酚A的檢測前處理僅有少量文獻(xiàn)報(bào)道，均采用簡單的萃取、濃縮或SPE固相萃取柱凈化。中檢維康研發(fā)團(tuán)隊(duì)將專一性強(qiáng)、穩(wěn)定性高的層析技術(shù)應(yīng)用于雙酚A檢測，力圖簡化樣品前處理，提高檢測靈敏度及凈化效果。

雙酚A親和柱能夠特異性的純化樣品中的雙酚A，將樣品溶液通過親和柱時(shí)，雙酚A鍵合在親和柱中的上。用蒸餾水將雜質(zhì)淋洗去除。將凈化、濃縮后的雙酚A從上分離下來。然后，注入HPLC或LC-MS進(jìn)行測定。

親和柱親和層析原理介紹

組氨酸是具有雜環(huán)的氨基酸，每個(gè)組氨基酸含有一個(gè)咪唑基團(tuán)，這個(gè)化學(xué)結(jié)構(gòu)帶有很多額外電子，對于帶正電的化學(xué)物質(zhì)有靜電引力，親和層析是利用這個(gè)原理來進(jìn)行吸附的，親和配體（也就是填料）上的陽離子（一般是鎳離子）帶正電對組氨酸有親和作用。組氨酸標(biāo)簽是原核表達(dá)載體上6個(gè)組氨酸的區(qū)段,這個(gè)標(biāo)簽在ph8.0時(shí)不帶電,對蛋白質(zhì)的分泌,折疊,功能基本上無影響.能高度親和鎳離子,用于蛋白質(zhì)的親和純化.