廣州碩譜生物科技有限公司Diol固相萃取柱價格

絕大多數(shù)的樣品都是用保留目標(biāo)物的模式凈化的，下面舉個例子：

食品中乙1二胺四乙1酸二鈉的檢測，樣品經(jīng)提取，絡(luò)合后，凈化；

SPE柱：月旭 Welchrom?SAX 150mg/6mL；

活化：5 mL 甲1醇、5 mL 水，棄去；

上樣：待凈化液全部上樣，控制流速，不宜過快，棄去；

淋洗：依次用5mL水，5mL甲1醇淋洗，抽干；

洗脫：5mL5%甲酸甲1醇水洗脫，抽干，收集洗脫液定容至5mL，過0.22μm濾膜，供液相色譜儀測定。

為什么 HLB小柱子不同于傳統(tǒng)的硅膠連接C18，廠商建議可不激1活平衡？

回答： SPE小柱活化平衡的目的有兩個，一是使功能團(tuán)填料的粘附性和伸縮性保持對目標(biāo)化合物的zui大吸附活性，另一個目的是去除填料本身可能引入的雜質(zhì)。硅膠鍵合C18，是一種在硅膠微球表面粘接的疏水性C18官能團(tuán)，為使其對目標(biāo)物保持充分吸附活性，需要在濕潤環(huán)境上樣物在填料表層形成的液膜(活化平衡)和上樣物的溶劑分子之間具有良好的相容性，目標(biāo)物在膜間進(jìn)行傳質(zhì)，與粘合C18發(fā)生疏水作用而保留，C18本身不具有水浸潤性，直接上樣物，C18蜷縮，且由于高度的疏水性，使其難以與目標(biāo)物中的目標(biāo)物分子充分接觸，因此必須充分保留 HLB小柱內(nèi)的目標(biāo)物分子， HLB采用聚合物改性材料，添加親水基團(tuán)，使其在上樣物溶劑中與目標(biāo)物分子充分接觸。

色譜柱保存

反相色譜柱，保存溶劑通常是含至少30% 有機(jī)相的水溶液，也可在常規(guī)清洗后直接保存在有機(jī)相中。

如果需要長時間儲藏，則需要使用較高比例的有機(jī)相（有機(jī)相比例至少大于50%）

固相萃取知識

要有效地利用離子交換機(jī)理將目標(biāo)化合物吸附在SPE柱上，必須滿足以下兩個條件：

（1）目標(biāo)化合物離子與吸附劑官能團(tuán)的離子態(tài)帶相反電荷；

（2）萃取環(huán)境的pH必須同時使目標(biāo)化合物和吸附劑上的官能團(tuán)帶電荷；

（3）萃取環(huán)境不能含有高濃度的帶有和目標(biāo)化合物相同電荷的競爭化合物。

在實際操作中，為了滿足前兩個條件，確保99%以上的目標(biāo)化合物及固相萃取吸附劑上的官能團(tuán)能夠呈離子態(tài)或呈中性狀態(tài)，應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物及固相萃取吸附劑官能團(tuán)的pKa來調(diào)節(jié)樣品或SPE柱的pH。

對SPE柱進(jìn)行合理的處理

在 SPE柱中，吸附劑可能存在少量干擾物，有效活化可避免干擾物進(jìn)入洗脫液中，活化溶液應(yīng)選擇整個洗脫過程中洗脫強(qiáng)度zui高的溶劑體系；在反相模式下，從樣品溶液到洗脫液的過程主要涉及到0%-100%甲1醇水溶液，因此應(yīng)選擇純甲1醇活化溶液，而在目標(biāo)化合物需要用甲1醇-甲ji叔丁基醚混合液洗脫時，則應(yīng)選擇純甲ji叔丁基醚溶液；在正相模式下，從樣品溶液到洗脫液的過程主要涉及到0%-100%正己烷-甲ji叔丁基醚溶液的過程，因此活化溶液應(yīng)選擇純甲ji叔丁基醚溶液。

色譜柱技術(shù)的差距在哪里？

答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗積累。

國內(nèi)和國外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國內(nèi)公司以前都不會自己開發(fā)填料，一般買國外現(xiàn)成填料裝柱，買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因為裝柱歷史短，經(jīng)驗積累少，裝柱工藝也沒有完全達(dá)到國外水平。另外，對色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠，國產(chǎn)的還不過關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比，差距很大。