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原位雜交電話「思特進」

發(fā)布時間:2021-10-10 08:39  

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武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時??梢蚤_展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針,與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N:~行雜交,通過熒光檢測系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測信號DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列,進而確定其雜交位點。FISH技術(shù)檢測時間短,檢測靈敏度高,無污染,已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領(lǐng)域。FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實驗室逐步進入臨床診斷領(lǐng)域。 基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。變性的核酸分子慢慢冷卻,互補的堿基對之間又會重新形成雙鏈分子,這一過程叫作核酸的復(fù)性作用或退火。


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;③FISH通過多次化學(xué)反應(yīng),使雜交信號增強,靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當(dāng)??梢蚤_展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





用于原位雜交的探針可以是單鏈或雙鏈DNA,也可以是RNA探針。通常探針操作的長度以100-400nt為宜,過長則雜交率減低。近研究結(jié)果表明,寡核苷酸探針(16-30 nt)能自由出入細菌和組織細胞壁,雜交效率明顯高于長探針,因此,寡核苷酸探針和不對稱PCR標(biāo)記的小DNA探針或體外轉(zhuǎn)錄標(biāo)記的RNA探針是組織原位雜交優(yōu)選探針。在水產(chǎn)方面,原位雜交技術(shù)則主要應(yīng)用于基因定位(多見于對魚類和貝類等水生物的研究)和病毒的檢測(多見于蝦類)。


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補發(fā)生共價鍵結(jié)合,能形成互補雜合雙鏈,而進行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)??梢蚤_展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





與其他原位雜交技術(shù)相比,熒光原位雜交具有很多優(yōu)點,主要體現(xiàn)在:①FISH不需要性同位素標(biāo)記,更經(jīng)濟安全。②FISH的實驗周期短,探針穩(wěn)定性高,特異性好,定位準(zhǔn)確,能迅速得到結(jié)果。③FISH通過多次化學(xué)反應(yīng),使雜交信號增強,靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當(dāng)。④多色FISH通過在同一個核中顯示不同的顏色可同時檢測多種序列。⑤既可以在玻片上顯示中期染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)的變化。熒光標(biāo)記探針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮短因單個探針分開使用導(dǎo)致的周期過程和技術(shù)障礙。也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結(jié)構(gòu)。 [1]


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。



目的探討熒光原位雜交技術(shù)(fluorescenceinsftuhybridization,F(xiàn)ISH)在復(fù)雜染色體異常產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用價值。方法對8例羊水、3例臍血常規(guī)G顯帶具有復(fù)雜染色體異常的產(chǎn)前診斷孕婦,應(yīng)用FISH技術(shù)確定其復(fù)雜染色體重排及標(biāo)記染色體的組成。結(jié)果FISH技術(shù)證實了G顯帶平衡易位的結(jié)果,同時明確了3例羊水中衍生染色體的組成、2例臍血中標(biāo)記染色體的來源。結(jié)論FISH技術(shù)具很高的敏感性和特異性,是明確染色體異常重要的分子細胞遺傳學(xué)工具,其在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,可為臨床提供更準(zhǔn)確的實驗依據(jù)。