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發(fā)布時間:2021-07-10 07:59  
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廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。hlb固相萃取柱供應商
防爆小柱體應用原理
固相萃取(SPE)技術(shù)是隨著樣品預處理要求的逐漸提高而被廣泛應用的。樣品經(jīng)選擇性吸附和洗脫后,進行富集分離。通常采用的方法是使液體樣品經(jīng)過吸附劑,保留其中的被測物質(zhì),然后選擇適當強度的溶劑沖去雜質(zhì),然后用少量的溶劑對被測物質(zhì)進行洗脫,從而實現(xiàn)快速分離、凈化和濃縮。還可以選擇性地吸附干擾雜質(zhì),讓被測物質(zhì)外流;或者同時吸附雜質(zhì)和被測物質(zhì),再用適當?shù)娜軇┻x擇性地洗脫。使用 SPE小柱的過程,以下我們將填充物設置為保留的目標化合物。預洗-活化-去除柱體中的雜質(zhì),即飽和平衡柱體。采用強、弱溶劑(緩沖液)依次激1活。上樣法——將樣品(包括分離物和干擾物)溶解在一種溶劑中,轉(zhuǎn)移到柱中,使組分通過吸附劑,吸附劑有選擇地吸附保留的分離物和某些干擾物。淋洗——用合適的溶劑淋洗吸附劑,將先前保留的干擾物選擇性地淋洗掉,分離物富集后留在吸附劑上。洗脫-用小容量溶劑從吸附劑中洗脫所測物質(zhì)并收集。
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正離子交換填料(SCX, MCX)
·分析物:陽離子(堿性)化合物
·方法:
(a)活化:樣品溶劑可在非極性有機溶1劑中活化;在極性溶劑中的樣品中,可在水溶性有機溶1劑過柱后與水平衡,然后以適當 pH值的緩沖溶液平衡。
5.溶劑洗脫強度:
-反相溶劑的洗脫強度:
水樣→甲1醇→異丙1醇→乙1腈→丙1酮→醋1酸乙1酯→乙1醚→四1氫呋1喃→二1氯甲1烷→氯1仿
四氯化1碳→異辛1烷→己1烷
正相溶劑洗脫強度:
己1烷→異辛1烷→四氯化1碳→氯1仿→二氯甲1烷→四氫呋1喃→乙1醚→乙1酸乙1酯→丙1酮→丙1酮
乙1腈,異丙1醇,甲1醇。
在反相-固相萃取模式中,溶劑體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減,而溶劑體系的洗脫強度應逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標化合物,所選的淋洗劑應在不洗脫目標化合物的前提下,很大限度地洗脫干擾物,所選的洗脫劑應能恰巧完全洗脫目標化合物。
作用機理:在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標化合物的極性官能團之間會產(chǎn)生極性作用力。普通吸附劑極性力作用在色譜中通常稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強,但比離子力更弱。常用的極性基團有羥基,胺基,巰基等。由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團,因此非極性基質(zhì)環(huán)境對吸附劑和目標化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明,在極性作用下,樣品的固相萃取過程中,基質(zhì)主要是非極性的,如正己烷、二氯甲1烷、菜油等,而目標化合物中多含有極性大的官能團。
含碳量
碳量是指填料的含碳量,從側(cè)面反映了C18的修飾程度,在分離效果和目標成分保持時間方面起著重要作用。對于相同類型的填料,高碳柱上的非極性化合物比高碳柱上的碳含量高,碳鏈增大,同時也增加了結(jié)合相的非極性作用面積。C18碳含量由不同的鍵合工藝決定,市場上C18碳含量一般在17-22%之間,也有一些特殊C18碳含量超過22%,但低于14%的C18填料。大部分樣本可以用普通碳含量的C18來解決。而C18的含碳量也并非越多越好,根據(jù)樣品性質(zhì)和純化需要選擇不同含碳量的C18,例如,極性較大的化合物在高含碳量的C18中的保留程度不如低含碳量的C18。
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洗脫和收集分析物(另一種情況是保留雜質(zhì)而分析物通過柱子)
在反相萃取柱上,清潔溶劑為含有農(nóng)業(yè)生產(chǎn)系統(tǒng)適當濃度的溶劑的水或緩沖液;
為確定清洗溶劑的濃度和體積,將試樣加到 SPE柱上,用5~10倍 SPE柱體積的溶劑進行清洗,對流出液進行連續(xù)分析,得到清洗溶劑對分析物的洗脫曲線。按順序增大清洗溶劑強度,根據(jù)分析物在不同強度下的洗脫曲線,確定合適的清洗溶劑強度和體積;
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洗脫和收集目的:將分析物全部洗脫并以小體積級分方式收集分析物,同時在 SPE柱上盡可能保留比分離物保留力更強的雜質(zhì);
收集的分析物級分可被氮氣吹干,然后溶解在小體積溶劑中,以提高分析物的濃度,或調(diào)整溶劑性質(zhì)以作后期分析。