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除氣采用流動(dòng)相脫氣，可避免 HPLC系統(tǒng)的故障，從而順利地獲得理想的數(shù)據(jù)。HPLC系統(tǒng)中不希望有氣泡存在。HPLC泵在輸送液體時(shí)會(huì)產(chǎn)生很大的作用力，因?yàn)闅怏w的壓縮比比液體大得多，所以有氣泡出現(xiàn)時(shí)，你會(huì)看到瞬時(shí)流速降低，系統(tǒng)壓力降低。若此氣泡足夠大，液相泵將無(wú)法輸送任何溶劑，并且當(dāng)壓力降到預(yù)定的壓力下限以下時(shí)，泵將停止工作。一些泵的設(shè)計(jì)很好的排除了氣泡，而有些泵的設(shè)計(jì)在有氣泡的情況下會(huì)停止工作。

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在輸液泵中，由于系統(tǒng)壓力較大，氣泡通常會(huì)在流動(dòng)相溶液中溶解，并與液柱相通。但當(dāng)進(jìn)入檢測(cè)器流通池后，系統(tǒng)壓力又恢復(fù)到氣壓，因此氣泡可能再次出現(xiàn)在檢測(cè)器流通池中，在色譜柱上會(huì)出現(xiàn)不規(guī)律的毛刺。在 UV/VIS/UV/VIS)探測(cè)器的液相色譜圖中，噪音毛刺通常是氣泡進(jìn)入和通過(guò)循環(huán)池的信號(hào)。另外，電化學(xué)(EC)檢測(cè)儀對(duì)流動(dòng)相中的溶解氧的存在十分敏感，它是由被測(cè)物質(zhì)在電極表面發(fā)生氧化還原反應(yīng)引起電流變化的。另外，泡泡的存在有時(shí)會(huì)造成保留時(shí)間不重復(fù)。因此，必須注意消除流動(dòng)相中的空氣，同時(shí)也要防止管道內(nèi)的空氣(例如 PTFE管)向流動(dòng)相滲透。

泵下一步要沖洗的是泵。在一次分析之后，不要在幾分鐘內(nèi)停泵，尤其是在流動(dòng)相中含有難揮發(fā)的緩沖液(例如磷酸鹽)。若不能連續(xù)使用，則在流動(dòng)相蒸發(fā)時(shí)，難揮發(fā)物會(huì)粘附在活塞密封墊面上，產(chǎn)生難揮發(fā)物沉淀。它是造成泵密封墊磨損和單向閥泄漏的主要原因之一。因此，不論使用時(shí)間長(zhǎng)短，在停泵之前都必須用無(wú)緩沖液流動(dòng)相沖洗泵在半個(gè)小時(shí)以上，如果流動(dòng)相中有難揮發(fā)的鹽類(lèi)，那么建議沖洗時(shí)間要長(zhǎng)一些。

自動(dòng)進(jìn)樣器自動(dòng)化進(jìn)樣器還應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行清洗。目前設(shè)備多配備有自動(dòng)進(jìn)樣器的洗液瓶，通常只要注意及時(shí)更換，補(bǔ)充沖洗液。還應(yīng)按照自動(dòng)化進(jìn)樣器中所用的洗滌液的流動(dòng)處理，并根據(jù)溶劑的有效期和規(guī)定，清洗儲(chǔ)液瓶或更換洗滌液。目前自動(dòng)取樣器的安裝、操作都很簡(jiǎn)單，如果時(shí)間允許(尤其是在夜間運(yùn)行)，每次分析后設(shè)純?nèi)軇?、2針(如、)，也是一種好的做法。4、色譜柱在使用過(guò)程中，對(duì)柱子的污染增大。一般表現(xiàn)是：基線運(yùn)行時(shí)，在已記錄的色譜中基線噪聲增加，泵壓力也增大。處理這一問(wèn)題有效的方法是在每一批樣品分析完畢或準(zhǔn)備卸下柱子時(shí)，清洗柱子(例如，、和水)。采用梯度沖洗效果較好，具體比例取決于柱體的使用說(shuō)明及性能。

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起因：①在線過(guò)濾堵塞②泵頭下訂單向閥堵?、蹤z測(cè)池很臟，也有可能是光路有些堵，再不行可能是燈壽命到了④抹布臟了，需要更換。對(duì)策：①在線濾網(wǎng)卸下，置燒杯，加純化水煮沸5-10分鐘后，超一下一般就可以了，如果還堵的話就拿稀泡，還不行，就換新的，這是個(gè)消耗品②將泵頭下端向閥卸下，兩個(gè)都可能堵死，剛卸下來(lái)時(shí)豎在耳邊搖晃就聽(tīng)不到聲音了。只需簡(jiǎn)單地拿起洗耳球?qū)蜗蜷y吹一下(方向)，吹了沒(méi)反應(yīng)可以拿溶劑超聲，但不可用水煮，一般超至在耳邊搖動(dòng)聲音就不會(huì)影響到。③先用溶劑將檢測(cè)池沖洗一下，具體的試樣用什么試樣；若不沖洗，將檢測(cè)池卸下，看燈能量，若能量還可以(有個(gè)幾千)，可能得清洗光路。首先還是請(qǐng)工程師來(lái)清洗，因?yàn)橐謇淼牧慵谔綔y(cè)器下面有一個(gè)黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來(lái)很麻煩。

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④拿出5個(gè)樣品盤(pán)，可以看到里面有一個(gè)黑色凸起(看不清是用電筒)，平時(shí)進(jìn)樣針就是從那個(gè)地方吸的。伸手就能卸下來(lái)，里面有一個(gè)小白圈(用多了自然就黑了)，換一個(gè)新的就好了，一般只有10個(gè)才能買(mǎi)儀器。在使用過(guò)程中，液相色譜有四個(gè)主要要素需要注意：1.液相色譜儀本身：通常儀器本身是沒(méi)有問(wèn)題的，尤其是新買(mǎi)回來(lái)的儀器。就儀器本身而言，的是儀器的檢驗(yàn)，新買(mǎi)回來(lái)的儀器一般都是由賣(mài)方先對(duì)儀器做系統(tǒng)的確認(rèn)工作(包括 IQ、 PQ、 OQ)，確認(rèn)順利通過(guò)后，再請(qǐng)國(guó)家或省級(jí)儀器檢定局的來(lái)校驗(yàn)，檢定合格后再用，檢定合格后再用，除此之外，還可以放心使用，此外，還可為儀器的正常使用提供保障。

一些柱效值的測(cè)量與計(jì)算方法由于色譜峰是假設(shè)在運(yùn)動(dòng)相中、固定相中樣品濃度為正態(tài)分布而獲得的樣品譜帶分布，所以常將色譜峰型看作正態(tài)曲線來(lái)計(jì)算理論塔板數(shù)。所以柱效(以理論塔板數(shù)量 n為單位)的公式習(xí)慣上定義為：在式中 tR為色譜峰的保留時(shí)間；σ2表示測(cè)定色譜峰與時(shí)間的偏差； a是與峰高(從測(cè)峰寬的基線量起)有關(guān)的常數(shù)，而ω b是用時(shí)間表示由色譜峰頂點(diǎn)與色譜峰的基線相交點(diǎn)的切線相交的距離。

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假設(shè)某一色譜峰為正態(tài)峰型，則每一種方法均能得到相同的結(jié)果。即便是獲得較為理想的峰型及溶質(zhì)，由于柱內(nèi)有溝槽或空隙，也會(huì)產(chǎn)生非正態(tài)峰型。因此不同的計(jì)算方法所得到的 n值相差較大。對(duì)于正常模式的偏離，通常用“前延”或“后延”表示。對(duì)這些峰型，測(cè)峰高度越高，計(jì)算出的理論塔板數(shù)值越大(精度越低)。很多情況下，色譜分析人員需要能夠反映整個(gè)峰型(包括拖尾)的柱效值，同時(shí)為了保證定量的重復(fù)性，還需要有很好的色譜峰對(duì)稱。此時(shí)色譜峰不對(duì)稱的計(jì)算方法是合適的。僅為了監(jiān)測(cè)色譜柱從次使用到壽命結(jié)束過(guò)程中的柱效，那么上述任何一種都可以，應(yīng)選擇簡(jiǎn)單的方法。