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發(fā)布時間:2021-07-08 10:40  
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核酸試劑盒
側(cè)向流檢測試紙條作為一種能夠快速、方便、簡單、無需人員和大型儀器設(shè)備操作的 一種檢測核酸的POCT方法,已經(jīng)在臨床診斷,環(huán)境監(jiān)測和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用研究。
為便于現(xiàn)場可視化檢測,本產(chǎn)品采用了FAM(FITC) -生物素報告基因進行層析檢測。陰性樣品中,金??股锼嘏c高濃度FAM(FITC) -生物素報告基因充分結(jié)合,結(jié)合物在對照Control條帶被抗FAM (FITC)攔截。對于陽性樣本,F(xiàn)AM(FITC) -生物素報告基因被裂解,金??股锼氐呐悸?lián)物生物素在檢測條帶積累,而在對照條帶積累減少。
RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非???/span>,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。RPA擴增的基礎(chǔ)體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑,我們只要準備好引物和模板就行。擴增結(jié)果可以通過凝膠電泳進行終點檢測,產(chǎn)物純化后可用于下游研究。
在這個基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針,就可以實現(xiàn)多樣化的RPA應(yīng)用。舉例來說,TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術(shù)和核酸外切酶III,能實現(xiàn)數(shù)據(jù)的實時讀取,就像熒光定量PCR一樣。不過反應(yīng)終點的擴增子總量有所減少,適合獲得強熒光信號進行動力學分析,不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術(shù)、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來,可以一步實現(xiàn)RNA模板的實時擴增。
等溫核酸試劑盒
側(cè)向流分析(LFIA)具有成本低、響應(yīng)快、易于使用和高通量等優(yōu)點。但LFIA與其他分析方法相比靈敏度較低,限制了其在不同領(lǐng)域的實際應(yīng)用。進而迫切需要一種新的標記分子,不僅易于合成,而且在信號產(chǎn)生和放大方面具有的物理/化學性質(zhì)。普魯士藍納米粒子(PBNP)具有良好的生物相容性和其它的性質(zhì),如低成本、高表面體積比、易于合成和表面改性等,一直受到生物醫(yī)學研究者的廣泛關(guān)注。
“強烈推薦CT影像作為目前新冠的診斷方法”,她表示,“病毒核酸檢測是確診新型冠狀病毒無創(chuàng)診斷的金標準,然而檢測結(jié)果‘CT陽性、核酸陰性’的結(jié)果,可能影響臨床排查。目前新型冠狀病毒核酸檢測特異性高、敏感性偏低,不排除存在部分假陰性?!?
在現(xiàn)實中,也出現(xiàn)了核酸試劑盒檢測數(shù)次陰性,卻確診為新冠的案例。