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4.樣品預(yù)處理在樣品基體比較復(fù)雜的情況下，樣品的純化過濾更為重要，樣品處理不好，容易堵塞樣品口和色譜柱。試樣要經(jīng)過過濾。5.其他堵塞現(xiàn)象●液相系統(tǒng)中常堵的位置有溶劑吸濾頭，它在管道內(nèi)會堵塞許多氣泡，根據(jù)吸濾頭材質(zhì)選擇合適的清洗方式，必要時更換新的?！駟蜗蜷y芯此處堵住，將導(dǎo)致泵內(nèi)壓力不穩(wěn)，有氣泡，嚴(yán)重時泵出液體，清洗不能排除故障時，更換配件?！褡詣舆M(jìn)樣器針座，此處堵了會造成進(jìn)樣口漏液，反沖無法解決故障時，更換針座密封，若進(jìn)樣隔墊堵塞進(jìn)樣針可用打火機(jī)加熱灼燒，試樣無法解決故障時，更換針座密封。色譜柱壓力升高，反沖不能解決，應(yīng)更換新柱子。循環(huán)池體積較小，如堵塞后無法沖出，可更換新配件。樣品瓶和蓋墊選擇不當(dāng)，可能對實驗結(jié)果造成影響，更嚴(yán)重的會對儀器造成損壞，如下圖中由于進(jìn)樣瓶蓋選擇不當(dāng)，導(dǎo)致進(jìn)樣針扎彎。

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樣品分析時，是否遇到過不均勻性差、數(shù)據(jù)分析有雜峰？碰到這樣的情況，很多小伙伴首先就會分析實驗的過程、實驗方法是否正確，但其實步應(yīng)該先看看進(jìn)樣瓶瓶蓋是否擰正。由于錯誤的擰蓋或壓蓋(針對鉗口瓶)也會對色譜分析產(chǎn)生干擾。見到這兒，相信大家都是一臉的問號。別不信，因為試驗測試結(jié)果顯示，進(jìn)樣瓶蓋擰得太緊，增加了產(chǎn)生雜峰的風(fēng)險(下面是測試譜圖)。接下來就讓我們一起來看一下擰蓋/壓蓋不正確所存在的危險，以及如何判斷蓋是否正確上緊/壓緊的狀態(tài)！(僅以2 mL樣品瓶、 PP蓋子和 PTFE/硅膠墊片為例，對鉗口瓶蓋墊也同樣適用。)

3、使用手動進(jìn)樣器應(yīng)注意的問題1)排出的毛細(xì)管出口和針口必須在相同的水平面上，以防止回流泄漏或2)在插入位置時，可將手動進(jìn)樣器的進(jìn)樣針移出，以防止倒吸或產(chǎn)生氣泡。此時還可以3)進(jìn)樣器進(jìn)樣量至少要大于2~3倍的定量環(huán)體積，或是少于定量環(huán)體積的一半。4)應(yīng)選擇液相平頭針三、自動進(jìn)樣器1.當(dāng)針頭吸完后，插入針座，進(jìn)樣閥在同一時間切換位置，將樣品導(dǎo)入到系統(tǒng)，完成2.自動進(jìn)樣器可設(shè)置其洗針，液相自動進(jìn)樣器的洗針，只是將針內(nèi)的針沾在洗針瓶里，也就是說，是針的外部，進(jìn)樣針是死體積的一部分。GC進(jìn)樣針洗針是由內(nèi)、外共同清洗，進(jìn)樣針不是3.液相色譜自動進(jìn)樣器可進(jìn)行多次液體吸收。

正如其他的分析儀器一樣，如果您希望 HPLC能很好地為您提供可靠的數(shù)據(jù)，那么您首先應(yīng)該對其進(jìn)行維護(hù)，使其處于良好的待機(jī)狀態(tài)，以便您在對其操作進(jìn)行分析時，能夠比較順利地得到理想的結(jié)果。并且良好規(guī)范的操作習(xí)慣能延長儀器的使用壽命。每個人上學(xué)或接受儀器公司培訓(xùn)時，老師或工程師都會提出許多操作上的注意事項。但是如果概括和概括一下，的有三點：除氣、過濾和沖洗。

被測樣品顆粒顆粒在液相系統(tǒng)中的第二個來源是試樣。有些實驗室把樣品放入自動采樣盤(或人工進(jìn)樣)之前，首先要經(jīng)過一個0.45μ m針筒式過濾器過濾。這種方法可以有效地去除樣品中的微粒。但這一過程要注意一點：你用了針筒過濾器，不可能100%獲得經(jīng)過過濾器測試的樣品，總會有或多或少的損失。損失源于以下幾個方面：過濾器過濾膜的吸附、過濾器濾出微粒的吸附、針筒濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。

如有丟失，過濾后的液體中被測物的含量或濃度是否與原始樣液的含量或濃度相同？這通常需要通過實驗加以證實。確定此步驟會增加工作量和成本。過濾是一種消耗，每臺過濾器的價格從幾元到十幾元。但是在分析食品中的殘留物時，由于底物大多比較復(fù)雜，因此過濾這一步就成為的步驟。實踐分析工作中，一般檢測每組樣品都要配外標(biāo)、加回收或質(zhì)控樣品，所以只要檢測得到的信噪比達(dá)到檢出限要求，就可以認(rèn)為這一步可以作為系統(tǒng)誤差而忽略。

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移動相中受熱，或流動相不同組分混合將產(chǎn)生氣體，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)造成壓力波動，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？梢栽囉靡韵路椒▉斫鉀Q問題：流動相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩者配合使用；改系統(tǒng)外混合前進(jìn)行混合。HPLC使用的流動相必須預(yù)先除氣，否則很容易在系統(tǒng)中漏氣，影響泵的工作。在體系中產(chǎn)生氣泡：流動相本身存在，梯度淋洗混合后會放出氣泡；氣泡的影響：存在于管道中，系統(tǒng)壓力不穩(wěn)定，實驗結(jié)果偏離；存在于單向閥中，容易導(dǎo)致液體回流，流量不準(zhǔn)確，甚至不吸液存在于檢測器中，對檢測器產(chǎn)生影響。因此對液相相對流動相的氣泡和雜質(zhì)要求比較嚴(yán)格。汽泡對柱子的分離效率有影響，檢測器的靈敏度、基線穩(wěn)定性甚至不能檢測。(噪音增加、基線不穩(wěn)定、突然跳動)。

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另外，溶解在流動相中的氧也可以與樣品、流體相甚至固定相(如胺)反應(yīng)。溶氣還會引起溶劑 pH值的變化，給分離和分析結(jié)果帶來誤差。溶氧能與某些溶劑(例如，、四氫)形成紫外吸收絡(luò)合物，這種配合物能夠改善背景吸收(尤其是低于260 nm)，并導(dǎo)致探測靈敏度的輕微下降，但更重要的是，會造成基線漂移或形成鬼峰(假峰)。熒光檢測中，在一定條件下，溶解氧也會引起溶解氧，尤其是芳香烴、脂肪醛、酮等。有時，熒光反應(yīng)可降至95%以上。電化學(xué)檢測(尤其是還原電化學(xué)法)對氧的影響較大。去除流動相中的溶解氧，將大大提高紫外檢測器的性能，并提高某些熒光檢測應(yīng)用中的靈敏度。常見的脫氣方法有：加熱煮沸、抽真空、超聲波、吹氦等。對于混合溶劑，采用抽氣或煮沸的方法，需考慮因溶劑揮發(fā)較低而引起的成分變化。