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外泌體TEM鑒定的行業(yè)須知「邁斯普」

發(fā)布時(shí)間:2021-05-27 07:21  

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武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國(guó)博士創(chuàng)辦。公司長(zhǎng)期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)?,F(xiàn)憑借自身技術(shù)特色,依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì),面向全國(guó)提供的生物技術(shù)服務(wù)。也就是說外泌體很有可能參與某些調(diào)控機(jī)制,這一發(fā)現(xiàn)極大的激發(fā)了大家對(duì)它的研究熱情(圖三)。


外泌體是細(xì)胞外囊泡的一種,直徑在30-150nm。外泌體廣泛存在于各種體液中,包括血液、、唾液、尿液和等。

研究發(fā)現(xiàn),外泌體廣泛參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。外泌體內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)和核酸,能夠通過生物屏障,在細(xì)胞間傳遞功能性核酸分子,從而發(fā)揮各種生物學(xué)功能。


武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國(guó)博士創(chuàng)辦。公司長(zhǎng)期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)。NTA檢測(cè)作為外泌體鑒定的經(jīng)典方法之一,可同時(shí)反映出檢測(cè)樣品的濃度及粒徑?,F(xiàn)憑借自身技術(shù)特色,依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì),面向全國(guó)提供生物技術(shù)服務(wù)。


外泌體的分離方法這么多,選擇哪一種更好?

超su離心法是目前常用的外泌體純化手段,此方法可以獲得高度純化的外泌體,但也存在一些缺點(diǎn)。例如同批次只能同時(shí)處理6個(gè)樣本(轉(zhuǎn)子限制)且回收率不穩(wěn)定,前期需要準(zhǔn)備大量材料且外泌體得率低。


武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國(guó)博士創(chuàng)辦。公司長(zhǎng)期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)。細(xì)胞和外泌體共孵育培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞可通過胞吞過程吞噬外泌體,外泌體包裹的蛋白質(zhì)、核酸等分子會(huì)釋放出來,從而影響細(xì)胞的功能變化?,F(xiàn)憑借自身技術(shù)特色,依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì),面向全國(guó)提供生物技術(shù)服務(wù)。


聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早期應(yīng)用于從血qing等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。在4℃利用PEG孵育后通過過濾或離心即可沉淀、回收外泌體。例如同批次只能同時(shí)處理6個(gè)樣本(轉(zhuǎn)子限制)且回收率不穩(wěn)定,前期需要準(zhǔn)備大量材料且外泌體得率低。采用此種分離方法也存在不少問題:純度和回收率低,雜蛋白較多,機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等。




在外泌體檢測(cè)及示蹤技術(shù)方面,傳統(tǒng)的手段存在諸多局限性,包括靈敏度低、耗時(shí)長(zhǎng)、樣品需求量大,難以實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)、大批量檢測(cè)等。BETZER等利用葡萄糖圖層金納米粒子(GNP)標(biāo)記外泌體,發(fā)現(xiàn)經(jīng)鼻給藥的標(biāo)記外泌體在腦部大量積聚,體現(xiàn)出這種外泌體標(biāo)記技術(shù)作為腦部疾病診斷及治1療工具的潛力。VERWEJ等利用綠色熒光蛋白(GFP)衍生物pHluorin標(biāo)記CD63,對(duì)外泌體進(jìn)行體內(nèi)示蹤,揭示了內(nèi)源性外泌體的分泌、擴(kuò)散和被靶1細(xì)胞攝取的過程。外泌體示蹤(染料-PKH67/PKH26/DIO/DIL)PKH-67(green)親脂性染料,可以穩(wěn)定的與細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)結(jié)合并發(fā)出熒光,PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天??傊饷隗w示蹤技術(shù)的發(fā)展將為外泌體的體內(nèi)活動(dòng)可視化提供基礎(chǔ),促進(jìn)外泌體機(jī)制的研究和藥1物載體的開發(fā)。