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發(fā)布時間:2021-10-11 06:02  
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經(jīng)過改造帶有HIS3報道基因的酵母細胞,只有當HIS3被啟動表達才能在缺乏組氨酸的選擇性培養(yǎng)基上生長。HIS3報道基因的轉(zhuǎn)錄表達是由“誘餌”和“獵物”的相互作用所啟動的。大多數(shù)雙雜交系統(tǒng)往往同時使用兩個甚至三個報道基因,其中之一是 LacZ。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調(diào)節(jié)機制。這些改造后的基因在啟動子區(qū)有相同的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點,因此可以被相同的轉(zhuǎn)錄因子(如上述的Gal4蛋白)。武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國博士創(chuàng)辦。公司長期致力于建立并完善多項基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺。其中一個重要改進是引入額外的報道基因,如廣泛采用的HIS3基因。現(xiàn)憑借自身技術(shù)特色,依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢,面向全國提供的生物技術(shù)服務(wù)。
RNase處理:在DNA-DNA雜交實驗中,RNase的處理可去除內(nèi)源性RNA,增加實驗的信噪比。在進行mRNA為靶標的檢測時,RNase處理的樣品也可作為質(zhì)控對照。大多數(shù)雙雜交系統(tǒng)往往同時使用兩個甚至三個報道基因,其中之一是LacZ。通常的處理方式是將DNase-free的RNase溶解于2×SSC (100μg/ml),樣品在溶液中37℃處理60min。
有了FISH,我們可以不再僅僅依賴分子生物學(xué)的方法來檢測DNA的表達了。FISH技術(shù)較大的優(yōu)點是可以在間期細胞核上直接觀察到DNA擴增,并且熒光信號的強度直接與DNA擴增水平直接相關(guān)。目的探討熒光原位雜交技術(shù)(fluorescenceinsftuhybridization,F(xiàn)ISH)在復(fù)雜染色體異常產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用價值。這些都大大促進了分子細胞遺傳領(lǐng)域的科學(xué)研究,同時也是臨床上診斷腫1瘤的利器。