低溫生物菌種——篩選模型

根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選產(chǎn)生菌的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗(yàn)菌生長(zhǎng)的抑菌物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對(duì)所提取的進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時(shí)間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進(jìn)一步作搖瓶發(fā)酵測(cè)定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。

生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)安全性分析

雖然目前生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)大多采用植物根際促生菌， 但近年來很多研究發(fā)現(xiàn)，芽孢菌屬和類芽孢菌個(gè)別菌株能產(chǎn)生菌素。 即便在安全分級(jí)目錄中列為一級(jí)免做理學(xué)試驗(yàn)的， 開展生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)， 從源頭上把好安全關(guān)是產(chǎn)品質(zhì)量安全的首要保障。通過調(diào)研發(fā)現(xiàn)， 用于生物有機(jī)肥產(chǎn)品的部分生產(chǎn)分類地位不明確， 甚至混亂， 難以從源頭上進(jìn)行安全風(fēng)險(xiǎn)的初步識(shí)別 。 以常見生產(chǎn)枯草芽孢菌為例， 實(shí)際上是一個(gè)表型相似的群體， 包括枯草芽孢菌、 地衣芽孢菌、 短小芽孢菌、解淀粉芽孢菌、 深褐 （萎縮） 芽孢菌、莫哈韋（莫杰夫） 芽孢菌、 死谷芽孢菌、 索諾拉沙漠芽孢菌、 特基拉芽孢菌、暹羅芽孢菌等 10個(gè)緣種。生產(chǎn)企業(yè)送檢的枯草芽孢菌生物有機(jī)肥產(chǎn)品， 經(jīng)鑒定發(fā)現(xiàn)很多產(chǎn)品實(shí)際為解淀粉芽孢菌， 且許多菌株具有很強(qiáng)的溶血作用。通過對(duì)生產(chǎn)企業(yè)調(diào)研發(fā)現(xiàn)， 部分生產(chǎn)企業(yè)選擇分離于動(dòng)物腸道的解淀粉芽孢菌作為產(chǎn)品生產(chǎn)用菌株， 該類生產(chǎn)發(fā)酵周期短、 活菌數(shù)量高、 生產(chǎn)成本低， 但產(chǎn)品的應(yīng)用功效不佳， 溶血風(fēng)險(xiǎn)大 ， 建議慎用。而植物來源的解淀粉芽孢菌溶血風(fēng)險(xiǎn)小， 產(chǎn)品應(yīng)用效果好， 推薦使用。

低溫生物菌種——常用菌種介紹

球形芽孢菌

球形芽孢菌是一種在自然界中廣泛分布、形成亞末端膨大孢子囊和球形芽孢的好氣芽孢菌。在已發(fā)現(xiàn)的49個(gè)鞭毛型中有9個(gè)(H1、H2、H3、H5、H6、H9、H25、H26和H48)的菌株對(duì)蚊幼蟲有一定的殺毒作用。其中大部分高毒力菌株屬型H5、H6和H25，如2362、1593、2297、Ts-1和C3-41等[6～11]。根據(jù)其殺蚊活性，這些菌株分為高毒力菌株和低毒力菌株，所有有毒菌株都具有較高的DNA同源性（>79%），屬DNA同源型IIA型。

球形芽孢菌對(duì)不同蚊幼蟲的殺毒作用主要是由其產(chǎn)生的毒蛋白實(shí)現(xiàn)的?，F(xiàn)已證明在其生長(zhǎng)發(fā)育過程中能產(chǎn)生兩類不同毒蛋白，一類是存在于所有高毒力菌株中的晶體毒蛋白；另一類是存在于低毒力菌株中部分高毒力菌株中的Mtx素蛋白。