固相萃取柱回收率低的原因及解決方法

固相萃取柱回收率低：

（1）可能原因：清洗溶劑選擇不當(dāng)；洗脫能力太強

解決方法：使用正確的清洗溶劑；選擇洗脫能更弱的溶劑

（2）可能原因：載樣時流速過快

解決方法：重力自然載樣或控制載樣流速≤1mL/min

（3）可能原因：SPE小柱太小

解決方法：?用更大規(guī)格的SPE小柱?用選擇性更強的SPE小柱?用載樣量更大的SPE小柱

（4）可能原因：洗脫前SPE小柱清洗溶劑抽干不充分

解決方法：充分抽干沖洗溶劑

（5）可能原因：洗脫不充分

解決方法：增加洗脫劑的體積，增加洗脫劑的強度；用更小規(guī)格的SPE小柱

（6）可能原因：洗脫時流速過快或過慢

解決方法：控制流速1～2ml/min

固相萃取柱——萃取技術(shù)介紹

固相萃取的前身就是柱層析技術(shù)。然而，人們在實踐中發(fā)現(xiàn)，如果一篇文獻中所提到的樣品前處理采用的是柱層析的方法，要重復(fù)文獻所提及的實驗往往是十分困難的。其主要原因之一就是實驗室自行裝填的層析柱填料來源不一，裝填的密度不一。當(dāng)然，得到的結(jié)果也就不同。這也是阻礙柱層析技術(shù)廣泛應(yīng)用的一個主要原因。

固相萃取柱簡介

其附帶的收集架，可同時進行多個SPE萃取操作，裝置配備的真空玻璃缸，可以讓使用者對收集樣品過程一目了然，頂蓋、底座及試管收集架全部采用防腐材料，耐強酸強堿，非常經(jīng)久耐用。裝置配置真空表及調(diào)壓閥組建，可進行簡單調(diào)節(jié)真空度。

SPE根據(jù)原理分為四種:反向SPE (RP-SPE)，正向SPE(NP-SPE)，離子交換SPE (IE-SPE）和吸附SPE。在大多數(shù)情況下，固相萃取多用于處理液體樣品如:萃取、濃縮和凈化樣品中的揮發(fā)性和半揮發(fā)性的化合物，而用于固體樣品時則須先將固體樣品轉(zhuǎn)變?yōu)橐后w樣品。

使用固相萃取柱時應(yīng)注意的影響因素

溶劑的選擇

在固相萃取中，萃取固定相的活化、上樣富集、淋洗雜質(zhì)、分析物洗脫的過程中，都涉及溶劑的選擇問題。溶劑選擇重要的是溶劑強度，這是保證固相萃取成功的關(guān)鍵表2給出了常見正相型和反相型固相萃取中溶劑的極性和強度大小關(guān)系。

對于固定相活化溶劑，一般先使用強的溶劑去除固定相上的雜質(zhì)，然后選擇與上樣溶劑強度一致的活化溶劑，以保證樣品能夠在固定相上充分保留。需注意的是，固定相在活化過程和活化結(jié)束后都要保持濕潤，否則會使固定相干裂或者進入氣泡，導(dǎo)致柱效降低、回收率降低以及重現(xiàn)性變差。

對于上樣溶劑的選擇，要盡可能選擇弱強度的溶劑，保證樣品能夠充分地保留在固相萃取柱上，還可以采用大量上樣方法，提高富集倍數(shù)。如果上樣溶劑強度過高，樣品不能保留或者弱保留，則回收率低。

對于洗脫溶劑，要選擇溶劑強度比較大的，保證保留在固定相上的樣品洗脫下來，對大多數(shù)化合物來說，是一種比甲、乙醇更好的洗脫溶劑。另外，選擇的洗脫溶劑要與后續(xù)的分析條件相適應(yīng)。還有就是要選擇黏度小、純度高、毒性小并且不與樣品和固定相發(fā)生反應(yīng)以及不會干擾樣品后續(xù)檢測的溶劑。如果單一的洗脫溶劑效果不理想，也可考慮使用混合溶劑進行洗脫。