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發(fā)布時間:2021-09-19 02:19  
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農(nóng)桿1菌轉(zhuǎn)化法在植物遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用:過去認(rèn)為受農(nóng)bacillus宿主范圍限制,農(nóng)bacillus介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化只限于雙子葉植物。1987年Grimsly首先將玉米條斑病毒的cDNA克1隆至質(zhì)粒上,用農(nóng)bacillus侵染的方法將玉米條斑病毒的cDNA導(dǎo)入玉米,使植株表現(xiàn)了系統(tǒng)感1染癥狀。這個報道有力地證明了農(nóng)bacillus能夠侵染玉米這種單子葉植物。隨著載體系統(tǒng)和轉(zhuǎn)化方法的改進(jìn),農(nóng)bacillus介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化不再局限于雙子葉植物,在一些單子葉植物如水稻、玉米和小麥等重要的農(nóng)作物上也相繼獲得成功。
進(jìn)入20世紀(jì)90年代后,農(nóng)桿1菌轉(zhuǎn)化法在水稻、玉米等重要的農(nóng)作物上取得突破性進(jìn)展。首先是1991年Gould和Shen等利用農(nóng)bacillus轉(zhuǎn)化玉米莖尖分生組織獲得轉(zhuǎn)0基因植株。1998年Lupotto也實現(xiàn)了農(nóng)bacillus轉(zhuǎn)化玉米的成功,Southern雜交結(jié)果顯示外源基因能夠穩(wěn)定遺傳到下一代。
基因(遺傳因子)是產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列?;蛑С种幕緲?gòu)造和性能。儲存著生命的種族、血型、孕育、生長、凋亡等過程的全部信息。環(huán)境和遺傳的互相依賴,演繹著生命的繁衍、細(xì)胞分裂和蛋白質(zhì)合成等重要生理過程。生物體的生、長、衰、病、老、死等一切生命現(xiàn)象都與基因有關(guān)。它也是決定生命健康的內(nèi)在因素。因此,基因具有雙重屬性:物質(zhì)性(存在方式)和信息性(根本屬性)。帶有遺傳信息的DNA段稱為基因,其他的DNA序列,有些直接以自身構(gòu)造發(fā)揮作用,有些則參與調(diào)控遺傳信息的表現(xiàn)。組成簡單生命少要265到350個基因。(這涉及基因工作組的力量,人類的基因工作組與果蠅的基本相似)
啟動子:RNA聚合酶特異性識別結(jié)合和啟動轉(zhuǎn)錄的DNA序列。有方向性,位于轉(zhuǎn)錄起始位點上游。上游啟動子元件:TATA盒上游的一些特定DNA序列,反式作用因子可與這些元件結(jié)合,調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄效率。反應(yīng)元件:與被的信息分子受體結(jié)合,并能調(diào)控基因表達(dá)的特異DNA序列。增強子:與反式作用因子結(jié)合,增強轉(zhuǎn)錄活性,在基因任意位置都有效,無方向性。沉默子:基因表達(dá)負(fù)調(diào)控元件,與反式作用因子結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)錄活性。Poly(A)加尾信號:結(jié)構(gòu)基因末端保守的AAUAAA順序及下游GT或T富含區(qū),被多聚腺苷酸化特異因子識別,在mRNA 3′端加約200個A。(2)反式作用因子:能識別和結(jié)合特定的順式作用元件,并影響基因轉(zhuǎn)錄的一類蛋白質(zhì)或RNA。