您好,歡迎來到易龍商務網!
發(fā)布時間:2021-01-20 09:13  
【廣告】





原位雜交(In Situ Hybridization)也叫原位雜交組化(in situ hybridization histochemistry, ISHH),是一種固相分子雜交的方法,bai它是用標記的DNA或RNA為探針,在原位檢測組織或細胞內特定核酸序列的方法。探針的種類按所帶標記物可分為同位素標記探針和非同位素標記探針兩大類。常用的同位素標記物有3H、35S、125I和32P,非同位素標記物中目前很常用的有生物素、地高6辛和熒光素三種。探針的種類按核酸性質不同又可分為DNA探針、cDNA探針、RNA探針和合成寡核苷酸探針。
原位雜交術可在原位檢測細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達,有很高的敏感性和特異性,已成為細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
多種探針標記檢測系統(tǒng)
基于地高3辛、生物素和熒光標記分子的標記和檢測系統(tǒng)是常見的原位雜交檢測方法。
熒光標記檢測常為直接探針標記方法,如在dUTP/UTP/ddUTP上連接Fluorescein后進行核酸標記。由于標記在核酸上的熒光分子必須經受雜交和洗脫過程中的考驗,以及熒光分子易于衰減,其檢測靈敏度受到一定的影響。但對熒光分子的直接檢測呈現(xiàn)的背景較低。
多彩色熒光原位雜交技術:顯而易見,是熒光原位雜交的升級版,采用多個熒光來檢測,目前的發(fā)展及運用也是較多的。
原位PCR:將原位雜交結合PCR技術發(fā)展起來的實驗方法。
基因組原位雜交技術:該技術在我們的領域可能運用的畢竟少,主要是根據(jù)物種DNA同源性差異實現(xiàn),在農作物等的雜交育種上運用較廣,
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
原位雜交組織(或細胞)化學技術簡稱原位雜交(In situ hybridization, ISH)是應用已知堿基順序并帶有標記物的核酸探針與組織細胞內待測的核酸,按堿基互補配對原則進行特異性結合,形成雜交體,然后用與標記物相應的檢測系統(tǒng),通過組織化學或免3疫組織化學方法在核酸原有位置進行細胞內定位、定性和定量研究。為分子水平研究細胞內基因表達及有關細胞5因子的調控提供了有效的工具??梢暈榻M織化學與免3疫組織化學的重大突破。
原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,并可完整地保護組織和細胞的形態(tài),更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態(tài)。
