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發(fā)布時間:2021-04-26 09:34  
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;,1986),在植物上早應(yīng)用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等2001。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補(bǔ)發(fā)生共價鍵結(jié)合,能形成互補(bǔ)雜合雙鏈,而進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)。雙鏈核酸分子加熱至80~100℃時,堿基對之間的氫鍵斷開,形成兩條單鏈,這一過程叫作核酸的變性作用或解鏈。變性的核酸分子慢慢冷卻,互補(bǔ)的堿基對之間又會重新形成雙鏈分子,這一過程叫作核酸的復(fù)性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的環(huán)境中也會變性,當(dāng)條件適合時又可復(fù)性。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。核酸分子雜交技術(shù)是基于核酸變性與復(fù)性的原理。
RNA原位 核酸雜交又稱RNA 原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點(diǎn),不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核。該技術(shù)是指運(yùn)用cRNA或 寡核苷酸等探針檢測細(xì)胞和組織內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是:在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段,按 核酸雜交中 堿基配對原則,與待測細(xì)胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交),所形成的 雜交體 (Hybrids)經(jīng) 顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù) 經(jīng)不斷改進(jìn),其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠(yuǎn)超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在 基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已成為有效的 分子病理學(xué)技術(shù),同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達(dá)方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。
(簡稱原位雜交,in situ hybridization histochemistry;ISHH)屬于分子雜交的一種,是一種應(yīng)用標(biāo)記探針與組織細(xì)胞中的待測核酸雜交,再應(yīng)用標(biāo)記物相關(guān)的檢測系統(tǒng),在核酸原有的位置將其顯示出來的一種檢測技術(shù)。將濾膜夾在兩張干的濾紙之間,在真空烤箱中于80℃干烤2小時,固定DNA。原位雜交的本質(zhì)就是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補(bǔ)規(guī)則與組織細(xì)胞內(nèi)待測的核酸復(fù)性結(jié)合而使得組織細(xì)胞中的特異性核酸得到定位,并通過探針上所標(biāo)記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。