生化檢測：Tris通常是作為生物緩沖劑，來維持生化反應(yīng)的pH值，由于本身顯弱堿性，通常搭配酸一起使用。常用的有Tris-鹽酸、Tris-磷酸鹽、Tris-醋酸 EDTA、Tris-硼酸 EDTA、Tris-甘氨酸等。主要是用于核酸、蛋白質(zhì)溶解的緩沖液，蛋白質(zhì)印跡電泳緩沖液、DNA印跡實(shí)驗(yàn)緩沖液、DNA瓊脂糖凝膠電泳緩沖液等。在反應(yīng)體系中通常有酶、蛋白質(zhì)及各種等，對緩沖劑要求時比較高的，因此采購時需要選擇精制產(chǎn)品的廠家，純度高、雜質(zhì)少才能保證生化實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。該類型緩沖劑溫度效應(yīng)大，易吸收空氣中的二氧化碳，使用時需要注意。

生物緩沖液Tris是一種氨基獨(dú)一不含鈉的氨基緩沖堿，不會給體系中帶入鈉、鉀離子，不影響滲透壓，必要時也可以加入生理鹽水調(diào)節(jié)鹽平衡。其對生物化學(xué)過程的影響很小，也不會與鈣、酶及重金屬離子生成沉淀，不影響激酶、磷酸酶、脫氫酶等多種酶的活性。通常用于DNA、RNA及蛋白質(zhì)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，常用緩沖體系有：Tris-HCl緩沖液、TBS緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、Tris甘氨酸緩沖液、Tris磷酸緩沖液等。需要注意的是Tris的pH值受溫度影響較大，要注意控制好溫度；Tris溶液顯堿性，會吸收CO2，要注意密封。

   很多實(shí)驗(yàn)的pH值設(shè)定在 7.4以模仿生物條件。假如你的蛋白在這個pH值下是穩(wěn)定的，那就非常棒了！如果不是，就需要改變pH值找到目的蛋白在溶液中處于可溶性且不會降解的狀態(tài)。

       一個經(jīng)驗(yàn)法則是：蛋白在它等電點(diǎn)pI附近的pH值溶液中會表現(xiàn)得不易溶解，因?yàn)榈鞍自谄涞入婞c(diǎn)的pH值溶液中表面沒有凈電荷，從而容易聚集。這里推薦用Expasy的ProtParam工具快速簡便地計(jì)算蛋白等電點(diǎn)pI值，只要提交蛋白序列即可。

 總的來說，TCEP是這三個還原劑中穩(wěn)定的，但它也是昂貴的。我通常在純化過程的緩沖液中添加DTT，在后保存酶液的緩沖液中添加TCEP。一般比較合理的還原劑濃度是5~10mM?；旧夏阋_保還原劑濃度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于你的蛋白濃度。因?yàn)镈TT和巰在室溫下就會降解，所以需要將添加了還原劑的緩沖液處于低溫保藏，或者在使用時再添加還原劑。