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發(fā)布時間:2021-01-10 19:41  
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三羥英文簡稱為Tris,英文名為2-Hydroxymethyl-2-nitro-1,3-propanediol,是一種重要的生物化學(xué)、化學(xué)和。Tris是常見的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液成分和滴定標(biāo)準物,作為可有效地急性肺損傷患者酸,誘導(dǎo)磷脂雙層膜形成波紋結(jié)構(gòu)的單層膜。同時還被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,以及其他多種重要用途。
工業(yè)合成:三羥本身由于結(jié)構(gòu)簡單,以中心碳原子呈四面體結(jié)構(gòu),含三個羥和一個氨基,可以進行多種取代和氧化還原反應(yīng),是一種化工合成原料。緩沖劑TAPS的一種合成方法就是利用Tris和1,3-丙磺酸內(nèi)酯在醇中合成的。通常要采購用于工業(yè)合成的Tris原料對試劑純度要求不高,重點是量大,找產(chǎn)能較大的原料生產(chǎn)廠家是比較劃算的。
蛋白制備及純化過程中緩沖液的選擇非常重要,合適緩沖液才能保證蛋白的活性和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。
當(dāng)我們純化蛋白時,的就是要保持蛋白在純化過程中不能失活,或者是盡量降低純化過程對蛋白活性帶來的損失。這就意味著蛋白在整個純化過程中要始終保持可溶性和活性。
因此設(shè)計一個防止蛋解和聚合的蛋白純化緩沖體系就非常重要了,尤其會凸顯在實驗結(jié)果上。在設(shè)計緩沖buffer時應(yīng)考慮以下幾個因素:pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩(wěn)定劑。其中每一個因素都要根據(jù)你的目的蛋白進行優(yōu)化,并以目的蛋白的活性作為優(yōu)化的評估標(biāo)準。
8mol/L乙酸鉀(potassium acetate):溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L(KCl):溶解7.46g于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸鈉(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中,用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三鈉鹽?;蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。