親和柱的概念

親和柱/親和膜,都是醫(yī)類分離器.如除內(nèi)親和柱,以Sepharose4B為基質(zhì)，配基為組氨酸，殼聚糖，季銨鹽等

實(shí)驗(yàn)采用親和柱-熒光光度法快速測(cè)定了鮮牛乳及乳粉中M1.試樣經(jīng)過離心、脫脂、過濾后,濾液經(jīng)過鍵合有M1特殊的親和柱凈化,此對(duì)M1具有專一的識(shí)別能力,M1鍵合在氯霉素、等親和柱分離柱中的上.將親和柱上雜質(zhì)除去,通過分離柱洗脫,加入溶液衍生,以提高測(cè)定靈敏度.衍生化后的洗脫液于熒光光度計(jì)中測(cè)定M1,檢測(cè)低限為0.01μg/kg,在0.1-1.0μg/kg范圍內(nèi),回收率為89.6%-96.1%,變異系數(shù)為0.52%-5.8%,分析一個(gè)樣品的時(shí)間小于30min.,分析過程中不使用M1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì).用FAPAS的參考標(biāo)樣證實(shí)了檢測(cè)方法、分析儀器和操作人員得到的結(jié)果是準(zhǔn)確可靠的。

親和柱的應(yīng)用

應(yīng)用：牛奶中M1的測(cè)定

（參考方法GB 541337-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中M1 的測(cè)定）

樣品前處理

稱取50g牛奶到具塞離心管中，在水浴中加熱到35-37℃，4000轉(zhuǎn)離心15min，除去上層乳脂，全部樣品待過柱凈化

樣品過柱凈化

1. 將親和柱（SBHL-20-0245）連接于10ml或50ml注射管下。

2. 將處理好的樣品全部通過親和柱，控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過柱。（注意：空氣不能通過柱體）

3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次，棄去全部流出液，并使2mL-3mL空氣通過柱體。

4. 洗脫，流速為1mL/min-2mL/min，收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測(cè)用。

雙酚A檢測(cè)新方法——親和柱凈化-液相色譜法

雙酚A，也稱BPA，在工業(yè)上被用來合成聚碳酸酯(PC)和環(huán)氧樹脂等材料。許多科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，雙酚A會(huì)發(fā)揮類似雌素的作用擾亂人體內(nèi)的代謝過程。。我國、歐盟、美國等都禁止其用于嬰幼兒奶瓶。但目前對(duì)于雙酚A的檢測(cè)前處理僅有少量文獻(xiàn)報(bào)道，均采用簡(jiǎn)單的萃取、濃縮或SPE固相萃取柱凈化。中檢維康研發(fā)團(tuán)隊(duì)將專一性強(qiáng)、穩(wěn)定性高的層析技術(shù)應(yīng)用于雙酚A檢測(cè)，力圖簡(jiǎn)化樣品前處理，提高檢測(cè)靈敏度及凈化效果。

雙酚A親和柱能夠特異性的純化樣品中的雙酚A，將樣品溶液通過親和柱時(shí)，雙酚A鍵合在親和柱中的上。用蒸餾水將雜質(zhì)淋洗去除。將凈化、濃縮后的雙酚A從上分離下來。然后，注入HPLC或LC-MS進(jìn)行測(cè)定。

親和柱親和層析的基本原理

親和層析是一種吸附層析，抗原（或）和相應(yīng)的（或抗原）發(fā)生特異性結(jié)合，而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。

所以將抗原（或）固相化后，就可以使存在液相中的相應(yīng)（或抗原）選擇性地結(jié)合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開，達(dá)到分離提純的目的。此法具有有效、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。