蛋白結晶板發(fā)展

可明顯提高其結晶成功率及晶體質量.隨著該方面成功案例的不斷積累,分子改造技術越來越凸顯出其在蛋白質結構解析中的重要作用,特別是對一些難以結晶或提高晶體質量的蛋白質而言,其應用價值更不可忽視.針對近年來分子改造技術在蛋白質結晶中的應用進行了回顧與總結,并展望了其未來的發(fā)展。

在高密度微孔板技術和DNA微陣列技術的基礎上發(fā)展起來的蛋白質芯片技術,能夠在蛋白質水平上進行基因高通量表達分析,從而成為蛋白質組學研究的有效方法.蛋白質芯片依靠手工,壓印或噴墨的方法將探針蛋白點樣在化學膜,凝膠,微孔板或玻片上形成陣列,經(jīng)過與樣品的雜交捕獲靶蛋白。

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蛋白結晶板過程

概括了蛋白質結晶的基本過程,闡述了蛋白質結晶的早期發(fā)展歷程,重點介紹了蛋白質結晶的近期研究狀況,主要包括:形核機理的研究,結晶條件的篩選和結晶技術的優(yōu)化以及基于結構的設計技術.特別是對離子液體在蛋白質結晶過程中的應用及發(fā)展前景進行了討論，

論述了國內(nèi)外生物大分子(蛋白質,酶等)沉淀結晶的研究現(xiàn)狀和進展,著重從結晶熱力學,粒子聚集,結晶的成核與晶體生長,以及場的作用等方面闡述了蛋白質沉淀結晶過程的特定現(xiàn)象與可能的結晶機理,對蛋白質的沉淀結晶過程作了的描述,并提出未來研究方向,為蛋白質結構分析,新藥設計,生化研究以及工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的基礎。

蛋白結晶板

形核劑的添加使蛋白質晶體異相形核,相較于均相形核其需要克服的阻力小,形核勢壘低.因而形核劑的使用對于難結晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質結晶具有重要意義.隨著結構生物學的發(fā)展,形核劑在蛋白質結晶中的研究仍是結晶方法學領域的熱點問題.多孔微球對蛋白質分子的吸附作用有利于無序蛋白質分子團簇的形成,進而促進蛋白質形核.添加多孔微球不但可以增加結晶條件篩選數(shù),也可以提高晶體質量.促進蛋白質分子有序排列的形核劑籽晶的使用,使晶體的形核生長過程始終處于結晶體系溶液濃度較低的狀態(tài),而交聯(lián)的籽晶因為穩(wěn)定性更高而更有應用前景.新型交互擴散結晶板中。