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發(fā)布時(shí)間:2021-09-20 04:59  

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伴隨著現(xiàn)代工業(yè)技術(shù)的不斷創(chuàng)新與進(jìn)步,液相色譜作為色譜研究的一種非常有效的手段,在我國(guó)工業(yè)基地得到了廣泛的應(yīng)用。HPLC更是分離小分子氣體等有機(jī)化合物的必備儀器,而液相色譜儀憑借其、高靈敏度、高分辨率,能夠適應(yīng)多種分離條件,并采用固定相和流動(dòng)相對(duì)有機(jī)化合物進(jìn)行充分處理。所以 HPLC定性分析對(duì)于現(xiàn)代工業(yè)的進(jìn)步和發(fā)展具有重要的作用,同時(shí)也加強(qiáng)了我國(guó)對(duì)、食品以及化工領(lǐng)域的滲透。

液相色譜在工業(yè)上的分析中,通常是由操控者對(duì)未知組進(jìn)行定性分析,對(duì)已知的組別進(jìn)行定量分析。本對(duì)液相色譜定性分析方法作了簡(jiǎn)要的論述和分析,努力使液相色譜的過(guò)程方法能夠?yàn)?HPLC所用領(lǐng)域的工作提供一些幫助。HPLC定性分析方法對(duì)高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、不易揮發(fā)、不易分解、分子量大的有機(jī)化合物的分析具有十分顯著的效果,對(duì)工業(yè)農(nóng)業(yè)中的有機(jī)化合物也有基礎(chǔ)的分析。

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采用兩譜聯(lián)用定性方法

HPLC中常采用紫外光、紅外對(duì)也要色譜進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描。然而,在工業(yè)生產(chǎn)中,常采用紫外檢測(cè)儀掃描 HPLC中的有機(jī)化合物,通過(guò) HPLC反應(yīng)定性地得出一些未知有機(jī)化合物的有用信息。通過(guò)相關(guān)工作人員長(zhǎng)期的經(jīng)驗(yàn),他們傾向于用液相色譜的大值對(duì)紫外線進(jìn)行掃描,通過(guò)全波長(zhǎng)掃描尋找兩個(gè)液相色譜高峰之間的聯(lián)系,然后通過(guò)上一步使用保留值的定性分析方法,對(duì)液相色譜中的未知無(wú)進(jìn)行性質(zhì)的判斷。除了這些,工作人員為了使現(xiàn)代的液相色譜定性分析方法更廣泛地應(yīng)用,一般采用色譜與質(zhì)譜聯(lián)用,這樣的操作可以對(duì)未知的有機(jī)化合物進(jìn)行多層次的質(zhì)譜分析,提高液相色譜的定性分析水平,在某個(gè)方面也促進(jìn)了液相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)系和應(yīng)用,為現(xiàn)代液相色譜分析方法提供了非常有效的兩用色譜定性分析方法。隨著科技的不斷進(jìn)步,串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用,使得現(xiàn)代 HPLC以雙譜聯(lián)用定性分析法廣泛應(yīng)用于中藥領(lǐng)域,在中藥品種、藥品鑒定等方面技術(shù)十分成熟,同時(shí)成果也十分顯著。除采用 HPLC和 MS聯(lián)用技術(shù)外,還采用了色譜與 NMR聯(lián)用等技術(shù),這是一種實(shí)用的兩譜聯(lián)用技術(shù),由于這一技術(shù)對(duì)定性要求不高,因此具有很好的通用性,但也因?yàn)樯V和 NMR聯(lián)用技術(shù)的要求較低,所以它在實(shí)際應(yīng)用中的使用也較少。




SCIEX毛細(xì)管電泳儀代理——廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司可為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)所需要的SCIEX耗材

毛細(xì)管電泳中,樣品分子的遷移是有效電泳濁度和電滲流清潔度的綜合表現(xiàn),而此時(shí)的清凈度被稱為表觀清凈。由于石英(或玻璃)毛細(xì)管表面的硅羥基解離,在大多數(shù)水溶液中都會(huì)產(chǎn)生一種負(fù)的定域電荷,并指向負(fù)極。毛細(xì)管中的電滲率比電泳速度大一個(gè)數(shù)量級(jí),因此樣品組分可以實(shí)現(xiàn)同向泳動(dòng)。在電滲和電泳中,正離子的運(yùn)動(dòng)方向是一致的,所以它首先流出。中立分子與電滲流同速,隨電滲入。負(fù)離子在中性顆粒后面流出,其運(yùn)動(dòng)方向與電滲方向相反。pH值與電滲流有密切關(guān)系。電滲透受 Zeta電位的影響, Zeta電位由毛細(xì)管壁表面的電荷決定,而電荷又受緩沖溶液的 pH值影響,因此電滲流的值是緩沖溶液 pH值的函數(shù),一般隨 pH值的增加而增大,到中性或堿性時(shí)值會(huì)變得很大。另外,毛細(xì)管洗滌過(guò)程、電泳緩沖液組成、粘度、溫度等對(duì)管壁上解離的影響也會(huì)發(fā)生變化。電磁以及許多能與毛細(xì)管表面作用的物質(zhì),如表面活性劑、蛋白質(zhì)等,對(duì)電滲流有很大影響。

電泳法作為一種伴隨電泳產(chǎn)生的電動(dòng)現(xiàn)象,在電泳法中起重要作用。大多數(shù)情況下,電滲流速度是電泳速度的5-7倍。毛細(xì)管電泳(CE)利用電滲流,使中性分子、正負(fù)離子向一個(gè)方向發(fā)生差速遷移,在一次 CE過(guò)程中同時(shí)完成正負(fù)離子的分離測(cè)定。電滲流的大小和方向影響著 CE分離的效率、選擇性和分離程度,因而成為分離條件優(yōu)化的重要參數(shù)。CE分離的重復(fù)性(遷移時(shí)間和峰面積)受電滲流的微小變化嚴(yán)重影響。因此,電滲流的控制是 CE的一項(xiàng)重要工作??刂齐姖B流的方法主要是改變緩沖液的組成和濃度、改變緩沖液的 pH值、添加添加劑、對(duì)毛細(xì)管內(nèi)壁進(jìn)行改性-物理或化學(xué)方法上涂覆及動(dòng)態(tài)去活;外加徑向電場(chǎng);改變溫度等。