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堿性三(羥甲基)氨基甲烷報價性價比出眾【騰飛】

發(fā)布時間:2020-12-28 09:26  

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Tris中文全稱三羥,CAS77-86-1,是重要的生物緩沖劑和酸量滴定法基準物質,有著極其廣泛的社會使用性。三羥:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris緩沖液,4℃時是8.4,37℃時是7.4,因此,4℃配制的緩沖液在37℃進行測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下,其緩沖能力極為不理想。







Tris緩沖液為弱堿性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質子化,從而提高其溶解性,所以在核酸的溶解及核酸提取中一般也使用Tris緩沖液。需要注意的是,因其配置溶液時顯堿性,會吸收部分空氣中能生成碳酸的二氧化碳氣體,所以需要將盛裝Tris溶液的瓶蓋蓋嚴。另外Tris溶液對溫度敏感,每升高1度,pH值下降0.03,配置時需維持在室溫。





TBST緩沖液 TBST中含有Tris-HCl,NaCl,tween20這三種物質,是做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液。目的是洗掉非特異性吸附的蛋白質,并且維持一個接近的天然環(huán)境。其中,Tween是一種離子表面活性劑,可加速非特異性結合的分離。因為Western Blotting中所用的膜可以與蛋白質結合,孵育過程中,能夠與膜非特異性結合。為了防止以后曝光造成膠片背景太高,在孵育后,混有Tween 20的TBS 能夠將非特異性結合的洗掉,增加特異性。




 此外,一些緩沖體系對溫度非常敏感,例如Tris-HCl緩沖液,如果你在25℃時將緩沖體系調至pH值8,pH值將在5℃時增加到8.58而在37℃時降到7.71。所以,如果打算在4℃條件下保存蛋白或在37℃進行實驗,就應該考慮到室溫下調的pH值可能在實驗條件中就不適用了。  其他類型的色譜分離柱,如凝膠過濾柱和Ni2 親和層析柱,可能需要更高的鹽濃度。我一般用高達500 mM NaCl進行高鹽淋洗,以防止蛋白和柱之間的非特異性結合。