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發(fā)布時(shí)間:2021-06-20 08:13  

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RPA技術(shù)主要依賴(lài)于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈 DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。


RPA能實(shí)現(xiàn)多重化嗎

可以。需要注意的是,RPA反應(yīng)的引物總量(nmol)不要超標(biāo)太多。如果在一個(gè)反應(yīng)中使用兩個(gè)以上的擴(kuò)增引物,就應(yīng)該控制不同引物的量。另外,我們應(yīng)當(dāng)事先考慮好檢測(cè)多個(gè)擴(kuò)增事件的探針、設(shè)備以及熒光團(tuán)的兼容性。


數(shù)字PCR法和熒光PCR法的關(guān)鍵區(qū)別在于檢測(cè)結(jié)果的定量和相對(duì)定量差異。據(jù)了解,現(xiàn)階段數(shù)字PCR試劑和機(jī)器相價(jià)格加高(一臺(tái)儀器近百萬(wàn)元),在SARS-CoV-2快速檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)并不大。