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原位雜交技術(shù)電話「在線咨詢」

發(fā)布時(shí)間:2021-07-05 16:24  

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原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精0準(zhǔn)確定量定位的過程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。

原位雜交(in situ hybridization)將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交,稱為原位雜交。

使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置。






原位雜交技術(shù)可應(yīng)用于什么方面

1.細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位 可用于基因圖譜、基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究。

2.感6染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類乳3頭狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測。

3.癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測。

4.基因在染色體上的定位。

5.檢測染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。

6.分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳








多種探針標(biāo)記檢測系統(tǒng)

基于地高3辛、生物素和熒光標(biāo)記分子的標(biāo)記和檢測系統(tǒng)是常見的原位雜交檢測方法。

熒光標(biāo)記檢測常為直接探針標(biāo)記方法,如在dUTP/UTP/ddUTP上連接Fluorescein后進(jìn)行核酸標(biāo)記。由于標(biāo)記在核酸上的熒光分子必須經(jīng)受雜交和洗脫過程中的考驗(yàn),以及熒光分子易于衰減,其檢測靈敏度受到一定的影響。但對(duì)熒光分子的直接檢測呈現(xiàn)的背景較低。