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發(fā)布時間:2021-04-15 03:44  
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懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液的更換注意事項?
通常情況下,換液時不需要每次都完全更換成新的培養(yǎng)基,除非細(xì)胞密度非常高或者是培養(yǎng)基的pH偏酸性(培養(yǎng)基顏色偏黃)。如需完全更換培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液在125g離心力下離心10 min,吸棄舊培養(yǎng)基,然后使用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
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什么是細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)?
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懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動或搖動的液體培養(yǎng)基里,培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團(tuán)的組織培養(yǎng)系統(tǒng),是非貼壁依賴性細(xì)胞的一種培養(yǎng)方式。在新的培養(yǎng)容器內(nèi)加入步驟3計算出的所需添加的新鮮培養(yǎng)基及細(xì)胞懸液。某些貼壁依賴性細(xì)胞經(jīng)過適應(yīng)和選擇也可用此方法培養(yǎng)。增加懸浮培養(yǎng)規(guī)模相對比較簡單,只要增加體積就可以了。深度超過5mm,需要攪動培養(yǎng)基,超過10cm,還需要深層通入CO2和空氣,以保證足夠的氣體交換。通過振蕩或轉(zhuǎn)動裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)的培養(yǎng)方法。
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細(xì)胞粘附到微載體,通過獨特的軟啟動、軟停止和間歇攪拌選項,可以獲得更高的細(xì)胞產(chǎn)率。前者保證攪拌器的緩加速和緩減速,避免培養(yǎng)基的過度湍流,消除對細(xì)胞的損壞。在粘附階段可以使用間歇攪拌,以減少對培養(yǎng)基的攪動,特別是培養(yǎng)易碎的細(xì)胞尤為重要!
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細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)是指細(xì)胞在生物反應(yīng)器中自由懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)生長增殖的一種培養(yǎng)方法。根據(jù)細(xì)胞是否貼壁,又分為全懸浮細(xì)胞培養(yǎng)和貼壁細(xì)胞微載體培養(yǎng)。國際上該項技術(shù)發(fā)展較快,已趨向成熟,是疫X苗、抗X體等生物制品生產(chǎn)的普遍生產(chǎn)工藝模式。