2、進(jìn)行病原體分離、鑒定、殺滅效果試驗(yàn),血1清學(xué)試驗(yàn),分子生物學(xué)研究等工作的實(shí)驗(yàn)室,由于使用已知和未知的微生物(細(xì)菌菌株、真菌菌株和病毒毒種等),當(dāng)微粒污染工作臺(tái)面等地方或在操作過(guò)程中,經(jīng)氣流沖擊將成為≤015μm的微粒,在空氣中形成氣溶膠狀態(tài),容易造成實(shí)驗(yàn)室感1染,在設(shè)計(jì)過(guò)程中要求該實(shí)驗(yàn)室的氣壓與一緩成相對(duì)負(fù)壓,回風(fēng)經(jīng)過(guò)過(guò)濾后,由風(fēng)機(jī)排放室外,不再重復(fù)使用,成為全新風(fēng)的實(shí)驗(yàn)室。3、室內(nèi)沉降菌潔凈室1～4號(hào)的工作臺(tái)面按14只/m2檢測(cè)沉降菌,平均為0115～c0125cfu/皿30min之間。

Pcr實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。車(chē)間凈化工程主要就是將一定空間范圍內(nèi)的空氣中的微粒子、有害空氣、細(xì)菌等污染物排除，并將室內(nèi)的溫度、潔凈度、室內(nèi)壓力、氣流速度與氣流分布、噪音振動(dòng)及照明、靜電控制在某一需求范圍內(nèi)，以保證產(chǎn)品可以在穩(wěn)定良好的環(huán)境下生產(chǎn)和制造。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)1制。通過(guò)DNA基因追1蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精1確度高達(dá)納米級(jí)別。

PCR實(shí)驗(yàn)室建立方法

1、建立樣品準(zhǔn)備區(qū)

這個(gè)區(qū)域?qū)ｉT(mén)用作樣品的準(zhǔn)備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采取預(yù)防措施:⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的DNA克1隆不能在這個(gè)房間操作。2、冷凍水調(diào)節(jié)：采用7℃左右的冷水作為冷源，通過(guò)電動(dòng)閥開(kāi)大或者關(guān)小來(lái)控制水流量，從而輕易控制制冷量，而電動(dòng)閥結(jié)構(gòu)象家用水龍頭一樣簡(jiǎn)單，所以故障率幾乎為零。⑵組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血1清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克1隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷DNA樣品應(yīng)該用有專(zhuān)門(mén)的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時(shí)有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨(dú)包裝的無(wú)菌一次性移液管吸取。⑹管子打開(kāi)前都要簡(jiǎn)短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開(kāi)，這樣會(huì)產(chǎn)生氣溶膠。⑺任何時(shí)候都應(yīng)該穿實(shí)驗(yàn)服和帶手套，手套要經(jīng)常更換，尤其在抽提過(guò)程中每一步之間都要更換。實(shí)驗(yàn)服要專(zhuān)門(mén)用于樣品準(zhǔn)備間，經(jīng)常清洗。

4、PCR實(shí)驗(yàn)室試劑的操作。

⑴所用的所有溶液都應(yīng)該沒(méi)有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。1、無(wú)塵車(chē)間室地面要求整體性好，平整、無(wú)縫隙、耐磨、耐腐蝕、耐撞擊、不易積靜電、易除塵清洗(如采用環(huán)氧自流平整地坪或現(xiàn)澆水磨石地面)。⑵所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過(guò)濾的，并且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類(lèi)的抗微生物劑，在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。⑷所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。⑸所有試劑和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。⑺樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。