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發(fā)布時間:2021-06-16 05:36  
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當前沒有直接測定法來測量Arl1 GTPases的激l活。
NewEast Biosciences Arl1激l活檢測試劑盒基于特定于配置的單克l隆抗l體,該抗l體特異性識別Arl1-GTP,但不能識別Arl1-GDP。 鑒于單克l隆抗l體對其抗原的高度親和力,可以在短時間內(nèi)進行激l活測定。 該測定法可提供可靠的結(jié)果,并具有一致的可重復性。
體外用GTPγS/GDP處理蛋白以用作陽性和陰性的對照
注意:在細胞體內(nèi)環(huán)境條件下大約有10%的Cdc42被激l活,而在體外用GTPγS處理大約有90%的Cdc42被激l活。
1. 準備兩個離心管,每個管中各加入0.5 mL的細胞提取物(如果是純的Cdc42蛋白則每個管中加入的蛋白量為1ug)。
2. 每個管中加入20ul 0.5M EDTA(終濃度即為20 mM)。
3. 一個管中加入5ul的100X GTPγS(終濃度即為100 uM)作為陽性對照。另一個管中加入5ul的100X GDP(終濃度即為1 mM)作為陰性對照。
4. 將離心管置于30°C條件下反應30min并不斷攪動。
5. 終止反應:將管置于冰上并加入32.5ul 1M MgCl2(終濃度即為60mM)。
GTPases的Rab家族調(diào)節(jié)真核水泡膜運輸。 Rab35與兩個血漿
膜和內(nèi)體定位,并涉及到包括T細胞受體回收,卵母細胞卵黃蛋白回收和胞質(zhì)分裂在內(nèi)的各種過程。 Rab35調(diào)節(jié)神經(jīng)元樣細胞中的神經(jīng)突生長,并可以誘導突起。
當前沒有直接測定法來測量Rab35 GTPases的活化。
NewEast Biosciences Rab35激l活檢測試劑盒基于特定于配置的單克l隆
特異性識別Rab35 GTP而不識別Rab Rab35 GDP的抗l體。鑒于...的高度親和力
抗原的單克l隆抗l體,可以在短時間內(nèi)進行激l活測定。這個
分析提供了可靠的結(jié)果,并具有一致的可重復性。
這些抗Rab35 GTP單克l隆抗l體也可以用于監(jiān)測大鼠Rab35的激l活。
1細胞和組織中的免l疫組織化學。
NewEast Biosciences Rab35激l活檢測試劑盒提供了一種簡單快速的方法來監(jiān)測
Rab35的激l活。每個試劑盒均提供足夠的量以執(zhí)行20個測定。
Gα13活化試驗。MEF細胞分別用LPA(第2道)或不加LPA(1道)處理。細胞裂解物用抗活性Gα13單克l隆抗l體(Cat)孵育。#26902)(頂面板)。這個用抗Gα13兔多克l隆抗l體(Cat)免l疫印跡法檢測沉淀活性Gα13#21005年)。底部的面板顯示了用抗Gα13的細胞裂解物的Western blot(5%在頂部面板中使用的)。