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發(fā)布時間:2020-12-04 19:49  
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RCCS?的培養(yǎng)容器中充滿了用作培養(yǎng)基的生長液以及細(xì)胞或組織材料。整個容器由電機(jī)驅(qū)動沿水平軸旋轉(zhuǎn)。細(xì)胞顆粒在水平軸內(nèi)建立均質(zhì)的液體懸浮軌道。培養(yǎng)基以及細(xì)胞顆粒隨容器一起旋轉(zhuǎn)且不與容器壁和它物相撞。由于系統(tǒng)無推進(jìn)器、空氣升液器、氣泡或攪拌器,使破壞性應(yīng)力減到zui小。RCCS中的細(xì)胞通過膜式氣體交換器來吸氧和排出CO2。任何氣泡都被清除,以防其旋渦對細(xì)胞的生長的影響。無破壞應(yīng)力使生成的三維組織具有與父系相同的結(jié)構(gòu)和功能。其組織的培養(yǎng)密度為10E10至10E11個細(xì)胞/ml;細(xì)胞的培養(yǎng)密度為10E8。至今所有的細(xì)胞組織都能培養(yǎng)。
RCCS三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的應(yīng)用?
1取材 在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的首1次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。3凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。
RCCS-3D模擬微重力三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)能夠使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷!
RCCS-3D模擬微重力三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)能夠使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
RCCS-3D旋轉(zhuǎn)三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)是一種不同于普通轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的系統(tǒng)。轉(zhuǎn)瓶包含一個縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下,氣體運(yùn)輸是通過瓶頸。并且,轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的目的不是三維培養(yǎng),而是二維培養(yǎng)。培養(yǎng)物沿著瓶壁生長,并且,當(dāng)瓶轉(zhuǎn)動,培養(yǎng)物就會與媒介接觸。因此,這兩個系統(tǒng)之間沒有相似性(參見問題1RCCS生物反應(yīng)器的工作原理)。
對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨1髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血1清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血1清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血1清蛋白形成了血1清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血1清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解1毒中起重要作用,如SeO3,硒等。