終止液（3M　H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入（98%）21.7ml。（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml加蒸餾水50ml。（6）　TMB（四）使用液:TMB（10mg/5ml無(wú)水乙醇）0.5ml底物緩沖液（PH5.5）　 10ml0.75%H2O2　 　32μl（7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg底物緩沖液（PH5.5）　 1ml3%H2O2　 　2μl（8）　抗原、和酶標(biāo)記。（9）　正常人和陽(yáng)性對(duì)照。



酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。



SOD Assay Kit-WST®使用了Dojindo自己發(fā)明的易溶于水的唑鹽：WST®-1（2-(4-碘)-3-(4-基)-5-(2,4-二磺酸)-2氫-四唑鹽,二鈉鹽），能夠和超氧陰離子反應(yīng)生成水溶性的染料，因此可以簡(jiǎn)便地進(jìn)行SOD的檢測(cè)。WST®-1與超氧陰離子反應(yīng)的劇烈程度比cytochrome C小70倍；因此，它的檢測(cè)靈敏度非常高，并且能夠通過(guò)將樣品用buffer稀釋，使背景的吸光度化。