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發(fā)布時(shí)間:2020-12-15 09:27  
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反相色譜是比較常用的色譜分離模式,占到了全部分析色譜的70%左右。通常只需優(yōu)化流動(dòng)相組成就可實(shí)現(xiàn)對(duì)大多數(shù)有機(jī)化合物和多肽的分離分析。反相硅膠色譜填料的制備方法比較簡(jiǎn)單,主要是通過(guò)硅膠表面羥基與帶不同烷l基鏈或試劑鍵合。其中C4、C8和C18 硅膠鍵合相是使用比較廣泛的反相色譜填料。反相色譜填料的研究是朝著柱效高、重現(xiàn)性好、分析速度快、制備方法簡(jiǎn)單、硅羥基掩蔽完全、選擇性好、pH使用范圍寬、壽命長(zhǎng)等目標(biāo)進(jìn)行。反相硅膠色譜填料發(fā)展主要是兩方面:一方面是制備越來(lái)越豐富的鍵合相以滿足HPLC 越來(lái)越廣的分離選擇性的要求;另外一方面是解決反相色譜填料表面殘留硅羥基帶來(lái)拖尾、pH適用范圍受限、及使用壽命短等問(wèn)題。反相色譜填料制備的過(guò)程中, 由于位阻原因,硅膠表面的硅羥基不可能全部與試劑反應(yīng),殘留的硅羥基在反相分離過(guò)程中會(huì)與極性分子形成非特異性吸附,導(dǎo)致l極性化合物尤其是堿性化合物色譜峰變寬,甚至嚴(yán)重拖尾,柱效下降等。另外殘留硅羥基還會(huì)影響硅膠色譜填料的耐酸堿性,并限制其pH使用范圍,縮短填料使用壽命。因此開(kāi)發(fā)有效封尾(封端)技術(shù)以減少或消除殘留硅羥基從而改善反相色譜填料性能是色譜填料研究的重要方向之一。另外在封端過(guò)程中引進(jìn)帶正電荷的功能基團(tuán)也可以屏蔽硅羥基對(duì)堿性化合物非特異吸附。
SEC色譜填料SEC色譜分離模式與其它所有分離模式很大的不同就是樣品分子與固定相表面配基之間不存在相互作用。SEC 對(duì)樣品組分分離只取決于填料的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關(guān)系,與流動(dòng)相的性質(zhì)沒(méi)有直接的關(guān)系。不同大小的溶質(zhì)分子可以通過(guò)擴(kuò)散遷移和滲透到不同大小的孔洞里。小分子,可以進(jìn)入更多更深的孔道里,因此小分子駐保留時(shí)間長(zhǎng),洗脫體積大,而大分子會(huì)被小孔排阻在外,只能進(jìn)入大孔孔洞中,因此其經(jīng)過(guò)柱床的路徑比較短,會(huì)先從柱子中洗脫出來(lái),從而實(shí)現(xiàn)具有不同分子大小樣品的分離。
其它色譜填料除了反相、正相、HILIC、手性及SEC外,硅膠還用于離子交換、疏水及親和色譜分離和分析。但由于離子交換、疏水及親和色譜填料主要用于生物分離分析,因此具有化學(xué)穩(wěn)定性好,耐酸堿性寬的聚l色譜填料更具有優(yōu)勢(shì)。目前市場(chǎng)上離子交換、疏水及親和色譜填料基本上都是基于高交聯(lián)度的多孔或無(wú)孔聚l色譜填料。硅膠色譜柱填料作為HPLC的核心,一直是色譜研究中關(guān)鍵的部分. 提高色譜填料的柱效、選擇性、峰容量和使用穩(wěn)定性, 增大填料的pH 使用范圍、延長(zhǎng)填料使用壽命, 具有多種分離模式將成為色譜填料的發(fā)展方向。
納微科技憑借其單分散硅膠基球精準(zhǔn)制造技術(shù)的優(yōu)勢(shì),開(kāi)發(fā)了新型有機(jī)雜化技術(shù),使得納微雜化硅膠pH使用范圍從pH 3-8 拓寬到pH 2-12。納微開(kāi)發(fā)出UniChiral系列手性色譜填料,其分離性能達(dá)到進(jìn)口同類材料的水平,而且憑借其單分散的優(yōu)勢(shì),其手性色譜填料具有更高柱效,更低的柱壓,和更長(zhǎng)的壽命;其次納微科技與納譜分析合作開(kāi)發(fā)出全系列NanoChrom體積排阻(SEC)的填料和色譜柱,由于納微SEC硅膠基球具有高度粒徑均一性,其耐壓性和壽命比進(jìn)口同類產(chǎn)品具有明顯的優(yōu)勢(shì)。同時(shí),納微還成功地開(kāi)發(fā)了耐堿性好的胰島素分離純化專用C8色譜填料,使得納微色譜填料在胰島素的分離純化上完全可以與同類產(chǎn)品相媲美。納微科技不僅是世界首l個(gè)開(kāi)創(chuàng)了單分散硅膠色譜填料規(guī)?;苽浼夹g(shù),還開(kāi)發(fā)了單分散聚合物色譜填料的規(guī)?;苽浼夹g(shù),極大拓展了世界單分散聚合物色譜填料粒徑、孔徑、及應(yīng)用的選擇范圍,并通過(guò)表面改性及功能化實(shí)現(xiàn)離子交換、疏水及親和色譜填料的產(chǎn)業(yè)化,可以滿足從小分子到大分子分離純化的各種需求。納微已經(jīng)成為世界上極l少數(shù)可同時(shí)大規(guī)模生產(chǎn)單分散硅膠和單分散聚合物色譜填料的公司。