試劑盒成分

特異性識(shí)別Cdc42活性構(gòu)象的鼠單克l隆抗l體（Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)）：小管裝--30ul (抗l體濃度是1mg/ml)，抗l體溶于PBS（pH7.4）并包含50%的甘油和0.05%的疊氮l化鈉。此抗l體可以特異性識(shí)別所有脊椎動(dòng)物中的Cdc42-GTP。

Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管裝—400ul包含200ul Protein A/G agarose     和200ul 20%乙醇溶液。（使用時(shí)溶液需要充分混勻，再吸?。?

5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶裝—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0),     750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。

特異性識(shí)別Cdc42活性構(gòu)象的兔多克l隆抗l體（Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody  (Catalog No.21010)）：小管裝--30ul (抗l體濃度是1mg/ml)，抗l體溶于PBS（pH 7.4）并包含有   50%的甘油。

100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管裝—100ul (10 mM) ，實(shí)驗(yàn)中0.5mL細(xì)胞裂解液使用      5ul GTPγS標(biāo)記。

100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管裝—100ul (100 mM) ，實(shí)驗(yàn)中0.5mL細(xì)胞裂解液使用5ul GDP標(biāo)記。

武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國(guó)生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國(guó)NewEastBio在中國(guó)的子公司。美國(guó)NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等，與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系，產(chǎn)品銷(xiāo)往全球。

所需但未提供的材料

1.刺激的和非刺激的細(xì)胞裂解液

2.蛋白酶抑制l劑

3. 4°C管搖桿或搖床

4. 0.5 M EDTA，pH8.0

5. 1 M氯化鎂

6. 2倍還原SDS-PAGE樣品緩沖液

7.電泳和免l疫印跡系統(tǒng)

8.免l疫印跡洗滌緩沖液，例如TBST（10 mM Tris-HCl，pH 7.4，0.15 M NaCl，0.05％

    吐溫20）

9.免l疫印跡封閉緩沖液（TBST包含5％脫脂奶粉或3％BSA）

10. PVDF或硝l酸纖維素膜

11.二抗

12. ECL檢測(cè)試劑

試劑準(zhǔn)備

?1X測(cè)定/裂解緩沖液：短暫混合5X儲(chǔ)備液，并在去離子水中稀釋至1X。 就在

用法中，添加蛋白酶抑制l劑，例如1 mM PMSF，10 μg / mL亮肽素和10 μg / mL抑肽酶。

Arl1激l活試驗(yàn)。純化的GST標(biāo)記的Arl1蛋白用抗活性Arl1單克l隆抗l體（Cat。#26924）用GDP（車(chē)道1）或GTPγS（車(chē)道2）處理后，用抗Arl1單克l隆抗l體（Cat）進(jìn)行印跡。#26056年）。顯示Arl1蛋白輸入控制在底部面板中。

產(chǎn)品描述

Arf樣蛋白1（Arl1）是調(diào)節(jié)性gtpase家族中的一員，位于Ras中GTPases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。Arl1至關(guān)重要用于果蠅和秀麗隱桿線蟲(chóng)的早期胚胎發(fā)育。Arl1在一級(jí)序列，細(xì)胞位置和功能（膜交通的調(diào)節(jié)）到Arf1–6甚至共享幾個(gè)共同的有約束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高爾基/跨高爾基網(wǎng)絡(luò)，有報(bào)道表明Arl1可能在離子穩(wěn)態(tài)中起作用酵母。

目前還沒(méi)有直接測(cè)定Arl1-gtpase活性的方法。NewEast Biosciences Arl1激l活檢測(cè)試劑盒是基于特定構(gòu)型的單克l隆抗l體特異性識(shí)別Arl1 GTP，但不識(shí)別Arl1 GDP的抗l體。鑒于單克l隆抗l體對(duì)其抗原，活化試驗(yàn)可在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。這個(gè)分析結(jié)果可靠，重現(xiàn)性一致。