科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)0基因植物時，常用什么中的質(zhì)粒作為載體？

（1）具有較小的分子量。經(jīng)驗表明，為了避免在DNA的純化過程中發(fā)生鏈的斷裂，克1隆載體的分子大小建議不要超過10Kb。pBR質(zhì)粒這種小分子量的特點，不僅易于自身DNA的純化，而且可容納較大的外源DNA部分片段；

（2）具有兩種抗1菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號，能指示載體或重組DNA分子是否進入宿主細胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子。標記基因往往可以賦予宿主細胞一種新的表型，這種轉(zhuǎn)化細胞可明顯地區(qū)別于非轉(zhuǎn)化細胞。當(dāng)我們把一個DNA部分片段插入到某一個標記基因內(nèi)時，該基因就失去了相應(yīng)的功能。當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細胞后，該基因原來賦予的表型也就消失了。要是仍保留了原來表型的轉(zhuǎn)化細胞，細胞內(nèi)含有的DNA分子一定不是重組子。很顯然，既要指示外源DNA是否進入了宿主細胞，又要指示載體DNA分子中是否插入了外源DNA部分片段，那么這種載體必須至少具有兩個標記基因。另外，pBR質(zhì)粒載體還具較高的拷貝數(shù)，而且經(jīng)過氯霉1素擴增之后，每個細胞中可積累1000~3000個拷貝，這就為重組體DNA的制備提供了極大的方便。

腺病毒(adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70～90 nm的顆粒，由252個殼粒呈廿面體排列構(gòu)成。每個殼粒的直徑為7～9 nm。衣殼里是線狀雙鏈DNA分子，約含4.7kb，兩端各有長約100 bp的反向重復(fù)序列。由于每條DNA鏈的5'端同相對分子質(zhì)量為55X103Da的蛋白質(zhì)分子共價結(jié)合，可以出現(xiàn)雙鏈DNA的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。

人體腺病毒已知有52種，分別命名為adl～ad52，研究得詳細是ad2。腺病毒基因組轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA，已知的轉(zhuǎn)錄單位至少有5個：EⅠ區(qū)位于病毒基因組左側(cè)，可再分成EⅠA和EⅠB，與細胞轉(zhuǎn)化有關(guān)；EⅡ區(qū)編碼DNA結(jié)合蛋白，參與病毒的copy；EⅢ區(qū)編碼出現(xiàn)在宿主細胞表面的一種糖蛋白；EⅣ區(qū)位于ad2基因組右端，受EⅡ區(qū)編碼的DNA結(jié)合蛋白質(zhì)調(diào)控；第5個轉(zhuǎn)錄單位在病毒感1染中期合成ad2蛋白質(zhì)Ⅳ。

腺病毒分離與鑒定

1．分離培養(yǎng) 標本應(yīng)盡早從感1染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物，糞便和尿液等，加抗1生素處理過夜，離心取上清接種敏感細胞（293、Hep-2或HeLa細胞等），37℃孵育后可觀察到典型CPE，即細胞變圓、團聚、有拉絲現(xiàn)象，較突出的表現(xiàn)是許多病變細胞聚在一起呈葡萄串狀。

2．病毒鑒定 用熒光標記的抗六鄰體抗1體與分離培養(yǎng)細胞作用來鑒定腺病毒，也可用血凝抑制（hemoagglutination inhibition，HI）試驗或中和試驗（neutralization test）檢測屬和組特異性抗原并鑒定病毒的血1清型。腺病毒可用Shell vial技術(shù)進行快速鑒定。病毒標本經(jīng)抗1生素和離心處理，取上清接種于有細胞的Shell vial培養(yǎng)瓶，孵育1～2天，用特異性六鄰體單克1隆抗1體對其抗原表位進行檢測。也可用病1人鼻粘膜上皮脫落細胞直接染色檢測病毒抗原。用DNA雜交或內(nèi)切酶酶切等鑒定分離培養(yǎng)的病毒DNA；PCR可用于腺病毒感1染的診斷，引物設(shè)計主要根據(jù)腺病毒六鄰體、VAI和VAII編碼區(qū)序列，能檢測所有血1清型，而且其敏感性很高，能檢測某些patient潛在的腺病毒。用腺病毒41型BgIII-D片段作探針診斷腺病毒腹瀉，其檢出率可達80%。

基因是控制生物性狀的基本遺傳單位。19世紀60年代，奧地利遺傳學(xué)家格雷戈爾·孟德爾就提出了生物的性狀是由遺傳因子控制的觀點，但這僅僅是一種邏輯推理。20世紀初期，遺傳學(xué)家摩爾根通過果蠅的遺傳實驗，認識到基因存在于染色體上，并且在染色體上是呈線性排列，從而得出了染色體是基因載體的結(jié)論。1909年丹麥遺傳學(xué)家約翰遜（W. Johansen，1859～1927）在《精密遺傳學(xué)原理》一書中正式提出“基因”概念。