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為什么反相填料C18使用時建議溶液的PH范圍是2-8？

C18填料是十八烷1基硅1烷鍵合硅膠，pH值超出酸性范圍時，鍵合相十八烷1基易發(fā)生水解而流失；當流動相pH超出堿性范圍時，會加速硅膠的溶解。這兩種反應均是不可逆的反應，會影響填料的性能。

當我們極端pH條件下需要使用反相填料時，建議使用聚合物基質的反相填料，如HLB,PSD等，聚合物基質的填料pH耐受范圍是1-14，適用范圍非常廣哦。

SPE小柱的使用過程

下面我們設定填料為保留目標化合物，分析過程如下：

1、預洗活化——除去柱子內的雜質，飽和平衡柱。依次用強溶劑、弱溶劑（緩沖溶液）進行活化。

2、上樣——將樣品（包括分離物和干擾物）用一定的溶劑溶解，轉移入柱并使組分通過吸附劑，吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。

3、淋洗——用適當?shù)娜軇┝芟次絼瓜惹氨Ａ舻母蓴_物選擇性的淋洗掉，分離物富集保留在吸附劑上。

4、洗脫——用小體積的溶劑將被測物質從吸附劑上洗脫下來并收集。

若取下立柱放置一段時間，需要采取什么保護措施？

答：對于一般的反相柱子，即清洗后將柱子兩頭放入純甲1醇或80%左右的甲1醇(乙1腈)水中，然后用堵頭塞緊柱子兩頭，以免溶劑揮發(fā)，應不需作特殊保護。

流動相中加入適量四氫呋1喃能改善峰形的機理是什么？

答：《HPLC方法與應用》一書于世林編著上書：甲1醇為質子提供體，乙1腈為質子接受體，四氫呋1喃為偶極溶劑，除極性影響外，還應存在其他影響因素，至于分離機理，仍較為復雜，不能將其視為全能方法。

一般實驗室，在少量樣品時，處理主要是以手工操作為主，常用的簡易設備如，真空抽濾：

還有一些，通過連接溶劑系統(tǒng)，處理大量液態(tài)樣品或洗脫液。

這種手工處理樣品只適合少量樣品，當個樣品量較大時，手工處理就顯得繁瑣而且花費很多時間，同時樣品間的均一性差異較大。

另外，一般實驗室常用的真空方法，會遇到很多實際問題，如：過濾速度不均、粘稠液體不通過，個別樣品可能還需要手工輔助處理，造成分析方法的變異較大。

所以現(xiàn)在一般都常用正向加壓的方法，目前，這是一種主流方法，使用范圍廣，均一性好。

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凈化效果不理想

凈化模式的改進

通常而言采用保留目標化合物的模式比保留雜質的模式凈化效果好，如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析，zui好是采用保留目標化合物的凈化模式；

如果不止一種SPE柱可用于目標化合物的凈化時，應挑選選擇性好的吸附劑；選擇性方面，離子交換＞正相＞反相。

淋洗液和洗脫液的優(yōu)化對于反相模式和正相模式，應在不影響回收率的前提下，增大淋洗液洗脫的強度并降低洗脫液的洗脫強度。

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PH對固相萃取的影響;開始接觸spe時，一直認為ph只對離子交換型的固相萃取模式有影響，實際上，對其它填料的固相萃取，也有很大影響。

以c18為例，當化合物呈離子狀態(tài)時，c18對于目標物的保留會大大降低，因此，對于弱酸性化合物，也要注意控制ph。例如呈離子狀態(tài)的酸性除草劑在c18很少保留，而在萃取前對樣品溶液進行酸化，抑制樣品離子化，可以大大提高回收率。