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發(fā)布時間:2021-09-07 13:29  
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制備色譜能當(dāng)分析色譜用嗎?
制備色譜與分析色譜差別較大在于精度。制備色譜為了獲得分離物質(zhì)的純度和量,適當(dāng)?shù)姆艞壛藢τ诰鹊目燎?。制備色譜當(dāng)做分析色譜用,應(yīng)該針對具體的樣品情況而定。樣品較易分離時,制備色譜還是可以當(dāng)分析色譜使用。分析色譜:在乎分析結(jié)果,對化驗結(jié)果的純度,比例等要求準(zhǔn)確,而對收率,濃度等產(chǎn)品參數(shù)不在乎,一次進(jìn)料,而且每次進(jìn)料少;制備色譜:比較在乎高效能得到純化物質(zhì)。
超級制備色譜系統(tǒng)
流動相的選擇
除了和分析色譜同樣的考慮外,在選用流動相時,要考慮色譜分離后面加有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等二次分離操作。一般來說,不宜采用高毒性溶劑,對多元溶劑要盡可能的少用。
如果產(chǎn)品中含有大量溶劑,溶劑的純度也要考慮在其中。
加樣的方法
可以采用以下方法之一進(jìn)樣。-用進(jìn)樣-用旋轉(zhuǎn)閥進(jìn)樣-通過六通閥進(jìn)樣-通過主泵進(jìn)樣-通過輔泵進(jìn)樣-固體上樣
泵的選用
生產(chǎn)制備色譜泵的廠商很多。根據(jù)有無脈沖、能承受的大壓力、控制的精度、售后服務(wù)等來選擇泵。
檢測器的選用
一般的分析池的大允許流速僅為5 mL/min 或者10mL/min。而專門的制備池的大允許流速可為150mL/min。有時,采用旁路分離管,將少量流體導(dǎo)入分析池進(jìn)行檢測,是一個不錯的辦法,但其濃度的誤差會相對較大。
我想用hplc分離一個簡單的多肽,我應(yīng)該選用什么樣的流動相,還有他的梯度,還有選用什么樣的柱子
答: RP-HPLC,C18柱可以制備很少量的肽。如果用RP-HPLC,首先應(yīng)該用同類型的分析柱子分析一下多肽含多少雜質(zhì),設(shè)置緩緩的梯度的分離樣品,在根據(jù)分析柱子跑出的峰形,逐漸放大純化的方法。