制備色譜能當(dāng)分析色譜用嗎？

制備色譜與分析色譜差別較大在于精度。制備色譜為了獲得分離物質(zhì)的純度和量，適當(dāng)?shù)姆艞壛藢?duì)于精度的苛求。制備色譜當(dāng)做分析色譜用，應(yīng)該針對(duì)具體的樣品情況而定。樣品較易分離時(shí)，制備色譜還是可以當(dāng)分析色譜使用。分析色譜：在乎分析結(jié)果,對(duì)化驗(yàn)結(jié)果的純度,比例等要求準(zhǔn)確，而對(duì)收率，濃度等產(chǎn)品參數(shù)不在乎，一次進(jìn)料，而且每次進(jìn)料少；制備色譜：比較在乎高效能得到純化物質(zhì)。

超級(jí)制備色譜系統(tǒng)

流動(dòng)相的選擇

除了和分析色譜同樣的考慮外，在選用流動(dòng)相時(shí)，要考慮色譜分離后面加有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等二次分離操作。一般來(lái)說(shuō)，不宜采用高毒性溶劑，對(duì)多元溶劑要盡可能的少用。

如果產(chǎn)品中含有大量溶劑，溶劑的純度也要考慮在其中。

加樣的方法

可以采用以下方法之一進(jìn)樣。－用進(jìn)樣－用旋轉(zhuǎn)閥進(jìn)樣－通過(guò)六通閥進(jìn)樣－通過(guò)主泵進(jìn)樣－通過(guò)輔泵進(jìn)樣－固體上樣

泵的選用

生產(chǎn)制備色譜泵的廠商很多。根據(jù)有無(wú)脈沖、能承受的大壓力、控制的精度、售后服務(wù)等來(lái)選擇泵。

檢測(cè)器的選用

一般的分析池的大允許流速僅為5 mL/min 或者10mL/min。而專門的制備池的大允許流速可為150mL/min。有時(shí)，采用旁路分離管，將少量流體導(dǎo)入分析池進(jìn)行檢測(cè)，是一個(gè)不錯(cuò)的辦法，但其濃度的誤差會(huì)相對(duì)較大。

我想用hplc分離一個(gè)簡(jiǎn)單的多肽,我應(yīng)該選用什么樣的流動(dòng)相,還有他的梯度,還有選用什么樣的柱子

答： RP-HPLC,C18柱可以制備很少量的肽。如果用RP-HPLC，首先應(yīng)該用同類型的分析柱子分析一下多肽含多少雜質(zhì)，設(shè)置緩緩的梯度的分離樣品，在根據(jù)分析柱子跑出的峰形，逐漸放大純化的方法。